當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> 轉氫酶1測試盒50管/48樣
貨號 | BJ-01S9755 |
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產品屬性:
產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
紫外分光光度法 | 50管/48樣 | BJ-01S9755 |
商品介紹:
測定意義:
TH位于線粒體的內膜上,又稱為線粒體復合體六,催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉化,調節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反應稱為TH-2,催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。
測定原理:
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的轉氫反應不能導致340nm吸光度發(fā)生變化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+,TH-2催化APAD+還原生成APADH,APADH在375nm有特征光吸收,測定375nm光吸收的增加速率,來計算TH-2活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (果糖含量測試盒說明書過過濾)。
4 ). 果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
人 PTPRC 轉錄變體1 基因全長ORF克隆
人 GOT1 基因全長ORF克隆
人 EIF4A3 基因全長ORF克隆
人 ABHD3 基因全長ORF克隆
人 S100PBP 基因全長ORF克隆
人 TRIM13 基因全長ORF克隆
人 KLHDC2 基因全長ORF克隆
人 CTH 基因全長ORF克隆
人 ABLIM1 基因全長ORF克隆
人 CREB3 基因全長ORF克隆
轉氫酶1測試盒50管/48樣人乙基丙二酸免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫試劑盒*直銷
人乙醇脫氫(ADH)免疫試劑盒進口、組裝
人乙胺碘呋酮(AD)免疫試劑盒進口、分裝
人胰脂肪(PL)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人胰抑制素(Pancreastatin)免疫試劑盒*直銷
人胰腺癌標志物CA242 免疫試劑盒進口、組裝
人胰高血糖素樣肽2受體(GLP2R)免疫試劑盒進口、分裝
人胰高血糖素樣肽2(GLP2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
人胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R)免疫試劑盒*直銷
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒進口、組裝
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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