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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 CD48 /

293T/17 (胚腎細胞) 100µL 小鼠抗S1標簽單抗 Anti S1-Tag Mouse MAb -20℃保存

2 ug pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative control 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Coronin-1A

乳糖膽鹽培養(yǎng)基 Lactose Bile Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人黑皮質(zhì)素受體4(MC4-R)ELISA試劑盒

100mg 辣根過氧化物，偶聯(lián)級 Horseradish Peroxidase，Conjugation Grade -20℃保存 1.56-100 ug/mL ELISA Kit for Human Creatine kinase B-type

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.5  Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.5  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Aquaporin-9

200次 微量樣品盒 Tiny Sample DNA-RNAOUT 4℃保存細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基配套平皿進口、國產(chǎn)Total Genes Chromogenic Medium Dish9㎝/塊

牛肝顆粒  100g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Adenylate cyclase type 1

乙酰胺肉湯 Acetamide broth 250g 312-20000 pg/mL 人皮卡丘素(Pikachurin)ELISA試劑盒

2 ug pGL2 -basic pGL2 -basic 低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL 人α羥基丁酸脫氫(α-HBDH)ELISA試劑盒

1瓶 7WD10株 7WD10 低溫運輸和保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Histidine-rich glycoprotein

1g 庚烷磺酸鈉 1-Heptanesulfonic Acid Sodium Salt 密封干燥保存 0.78-50 ng/mL 人亞甲基四氫還原（Methylenetetrahydrofolate reductase）ELISA試劑盒

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。