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貨號 | BJ-X96519 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96519 |
商品介紹:
名稱 RWPE-1 (正常前列腺上皮細(xì)胞) 別稱RWPE1 年齡(性別)男;54歲 組織來源器官:前列腺; 疾病:正常; 細(xì)胞類型:上皮細(xì)胞 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述一位正常男性前列腺組織切片的周圍區(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進(jìn)行轉(zhuǎn)化,建立了RWPE-1細(xì)胞株[PubMed:9214605]。在三維Matrigel培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA[PubMed:11170142]。當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時,RWPE-1細(xì)胞也能形成腺胞[PubMed:11304724]并產(chǎn)生PSA。來源于RWPE-1細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細(xì)胞株[PubMed:9214605]和RWPE2-W99細(xì)胞株。另外,用N-甲醇-N-(MNU)處理RWPE-1細(xì)胞,建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時期的成瘤細(xì)胞株。它們是WPE1-NA22、WPE1-NB14、WPE1-NB11和WPE1-NB26細(xì)胞株。據(jù)提供者報道,RWPE-1細(xì)胞經(jīng)過檢測,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈陰性。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基K-SFM+0.05mg/mL BPE+5ng/mL EGF+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~22 hours 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性No, in nude mice (with or without Matrigel). No, in soft agar. 受體表達(dá)情況androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen) 抗原表達(dá)情況kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen); (upon exposure to androgen) 基因表達(dá)情況cytokeratin 18, cytokeratin 8; Tumor Supressor Gene(s): p53+, pRB+ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
人 TGF-beta 3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 TROP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 TROP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 Vitronectin 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 PTEN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 PTEN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 TNFRII 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 IL6R 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
RWPE-1 (正常前列腺上皮細(xì)胞)250mg 新生 Novobiocin Sodium Salt 4℃保存 1.56-100 ng/ml 白j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒
2 ug pDG1363 pDG1363 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人髓過氧化物(MPO)ELISA試劑盒
2 ug pVSV-G pVSV-G 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 AMS2株 AMS2 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL 人白介素7受體α亞基(IL-7RA)ELISA試劑盒
100次 溴化乙錠清除劑 EB Erasol 室溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Phosphatidylethanolamine-binding protein 1
1 管 AH109酵母菌 AH109 Yeast Strain -80℃保存 0.78-50 ng/mL 轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
500 mL McCoy's 5A培養(yǎng)基(含1%雙抗+10%小牛血清) Cell Culture Medium -20℃保存水解酪蛋白瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Casein Agar Medium250克用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗
2 ug pSC194 pSC194 低溫運輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL 肉毒桿菌(E/F型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
2 ug pRSET C pRSET C 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人活化T-核因子1(NFATC1)ELISA試劑盒
5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒(適用Oligo探針) Nonradioactive Probe Hybridization Kit 雜交液-20℃保存,其余成分常溫
FB1(Half-Fraser)添加劑(A、B) FB1 additive(A、B) 2ml/支*40 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Coagulation factor X
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
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