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貨號(hào) | BJ-X96529 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96529 |
商品介紹:
名稱 SiHa (子宮頸鱗癌細(xì)胞) 別稱Siha; SIHA 種屬人類 年齡(性別)女性,55歲 組織來源子宮頸鱗癌 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述SiHa細(xì)胞是建自一個(gè)日本病人的外科手術(shù)的原位組織樣品。電鏡觀察表明,在SiHa細(xì)胞連接處有典型的橋粒,在SiHa細(xì)胞胞質(zhì)中有豐富的張力絲。在裸鼠中,SiHa細(xì)胞能形成低分化的表皮樣癌(Ⅲ級(jí));SiHa細(xì)胞中,癌基因PRB和p53陽性。 生物安全等級(jí)2 [Cells contain human papilloma virus] 生長培養(yǎng)基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~50-60小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性Yes, in nude mice; forms poorly differentiated epidermoid carcinoma (grade III). 基因表達(dá)情況Oncogenes: p53+; pRB+ |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
人 ITK Kinase 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 ITK Kinase 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 CD34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CD34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
人 GPC6 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CD55 / DAF 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 CD55 / DAF 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體),
SiHa (子宮頸鱗癌細(xì)胞) 100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH6.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH6.0 常溫保存
2 ug SD1211- 1 SD1211- 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.312-20 ng/mL. ELISA Kit for Human RISC-loading complex subunit TARBP2
25g 丙酮酸鈉 Pyruvic Acid Sodium Salt -20℃保存 78-5000 pg/mL 人解偶聯(lián)蛋白1(UCP-1)ELISA試劑盒
1 管 K802大腸桿菌 K802 E.coli Strain -80℃保存LB Lennox瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)LB Lennox Agar250克BR
1瓶 N/N1003A(RLE)株 N/N1003A(RLE) 低溫運(yùn)輸和保存 15.6-1000 pg/mL 人蛋白S100-A4(Protein S100-A4)ELISA試劑盒
250g 干粉型LB-Lennox培養(yǎng)基 LB-Lennox Medium Powder 常溫布氏菌選擇性培養(yǎng)基進(jìn)口、國產(chǎn)Brucella Selective Medium用于布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)250
50次 柱式血液DNAout Column Blood DNAOUT 常溫 7.8-500 pg/mL 人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) Modified Mcbride Agar Base 250g發(fā)酵管進(jìn)口、國產(chǎn)發(fā)酵管20支BR
2 ug pYr-AdShuttle- 3 pYr-AdShuttle- 3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存禽膽鹽進(jìn)口、國產(chǎn)Bile salt from poultry25克BR
2 ug pYX212 pYX212 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Catenin beta-1
50次 一管式病毒DNA-RNAout One-Tube Viral DNA-RNAOUT 溶液A 4℃保存,溶液B和溶液C室溫保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human RING finger protein 39
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