當(dāng)前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> SW 982 (SW-982, SW982) (滑膜肉瘤細(xì)胞)
貨號 | BJ-X96766 |
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操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | BJ-X96766 |
商品屬性:
名稱 SW 982 (SW-982, SW982) (滑膜肉瘤細(xì)胞) 別稱SW-982; SW 982 種屬人類 年齡(性別)女性,25歲 組織來源組織:滑膜;疾病:滑膜肉瘤 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)混合形 背景描述SW 982 [SW-982, SW982]是由A·Leibovitz在1974年從一位25歲白人女性的纖維肉瘤手術(shù)切片中建立的細(xì)胞株;病理組織學(xué)評價認(rèn)為,建立SW 982 [SW-982, SW982]細(xì)胞株的纖維肉瘤是與脂肪肉瘤一致的未分化惡性腫瘤。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,100% 溫度:37℃ 注意事項1、該細(xì)胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳,會產(chǎn)生細(xì)胞毒性; 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱,可使用DMEM替代Leibovitz's L-15,使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳; 2、配套專用培養(yǎng)基默認(rèn)Leibovitz's L-15配置,如需DMEM配方,請聯(lián)系銷售下單備注更改。 |
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
食蟹猴 FGFR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD302 / CLEC13A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 SHH / Sonic hedgehog 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 DPEP2 / MBD-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人
SW 982 (SW-982, SW982) (滑膜肉瘤細(xì)胞) 50L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液(干粉) Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存 0.156-10 ng/mL 人/谷轉(zhuǎn)運體(XCT)ELISA試劑盒
5g 固藍(lán) BB 鹽 Fast Blue BB Salt -20℃避光保存 6.25-400 nmol/L ELISA Kit for Human Galactocerebrosidase
2 ug pCMV-VSV-G pCMV-VSV-G 低溫運輸,-20℃保存
50次 動植物總蛋白微量提取試劑盒 Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit 4℃保存 62.5-4000 pg/mL ELISA Kit for Human Pappalysin-1
1瓶 HCT-15株 HCT-15 低溫運輸和保存嗜鹽菌選擇性瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)Halophilic Bacteria Selective Agar250克副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
2 ug pRevTet-On pRevTet-On 低溫運輸,-20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Proheparin-binding EGF-like growth factor
2 ug pLVTH pLVTH 低溫運輸,-20℃保存
氯化鈉胰蛋白胨稀釋液 NaCl Tryptone Broth 250g
亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基 Sulfite Reducing Anaerobes Spore Liquid Medium 250g 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ras-related protein Rab-8A
1 管 C43(DE3)大腸桿菌 C43(DE3) E.coli Strain -80℃保存 0.312-20 ng/mL 人分選微管連接蛋白9(Sorting nexin-9)ELISA試劑盒
24 T 測試盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sphingosine 1-phosphate receptor 3
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