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貨號	BJ-X96544

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產(chǎn)品名稱	SW620 (結(jié)腸癌細胞)
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號	BJ-X96544

商品屬性：

名稱 SW620 (結(jié)腸癌細胞)

別稱SW-620; SW 620; SW.620

種屬人類

年齡（性別）男性，51歲

組織來源結(jié)直腸腺癌，來自轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述SW620細胞是從一個51歲男性白人組織中分離得到的，由A·Leibovitz等從一個淋巴結(jié)建株。SW620細胞主要由無絨毛的小園球細胞和雙極細胞組成;SW620細胞僅合成少量癌胚抗原(CEA)，在裸鼠中有高度的致瘤性。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~20-26小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，100%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

抗原表達情況Blood Type A; Rh+

基因表達情況Carcinoembryonic antigen (CEA) 0.15 ng/10^6 cells/10 days; transforming growth factor alpha; matrilysin. The cells are negative for expression of CSAp (CSAp-) and colon antigen 3, negative. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis and fos oncogenes.

注意事項1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會產(chǎn)生細胞毒性； 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳； 2、配套專用培養(yǎng)基默認Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請聯(lián)系銷售下單備注更改。

細胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人 IFI44L 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 CTSD 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 ALDH3B2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 ACKR2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 GNA13 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 CCNI 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 BVES 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 CD72 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

人 CNNM3 基因全長ORF克

SW620 (結(jié)腸癌細胞) 5次隨機引物法DNA探針辛標記試劑盒 Random Primer DNA Labeling Kit Series -20℃保存

200mL 乙烯乙二醇 Ethylene Glycol -20℃保存mTSB肉湯進口、國產(chǎn)mTSB Broth With Novobiocin用于0157選擇性增菌(ISO方法)250

1 mg LY 294002（PI3K抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon

50T 水泡病毒PCR檢測試劑盒低溫運輸，-20℃保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Delta-1-pyrroline-5-carboxylate dehydrogenase, mitochondrial

30µL HRP標記內(nèi)參抗體（GAPDH）

2 ug pRNA-H1.1/Adeno pRNA-H1.1/Adeno 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Connective tissue growth factor

2 ug pBAD33 pBAD33 低溫運輸，-20℃保存 0.78-50 ng/mL 人類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒

1瓶 L6565株 L6565 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL 人粘蛋白4(MUC4)ELISA試劑盒

500mL Phosphate Buffer，0.2M, pH7.0 Phosphate Buffer，0.2M, pH7.0 常溫保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-IV

100次植物種屬鑒定PCR Mix 4（質(zhì)體 matK） Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存改良鹽緩沖液進口、國產(chǎn)PSB250克用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌冷增菌培養(yǎng)

2 ug pMXmKate(650) pMXmKate(650) 低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人核苷二還原亞基M2(RIR2)ELISA試劑盒

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。