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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> NCI-H295R (腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞)
貨號(hào) | BJ-X96717 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96717 |
商品介紹:
名稱 NCI-H295R (腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 別稱NCI H295R; NCIH295R; H295R; H-295R; H295R-S1 種屬人類 年齡(性別)48歲 組織來(lái)源器官:腎上腺 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述NCI-H295R細(xì)胞是源于多能腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系NCI-H295細(xì)胞,后者由Gazdar·A·F等建立,從腎上腺皮質(zhì)的腫瘤中分離而來(lái)。NCI-H295細(xì)胞經(jīng)改變培養(yǎng)條件獲得了NCI-295R細(xì)胞,群體倍增時(shí)間從原來(lái)的5天減為2天。NCI-295細(xì)胞懸浮生長(zhǎng),而NCI-H295R細(xì)胞呈單層貼壁生長(zhǎng)。NCI-H295R細(xì)胞保留了產(chǎn)生雄激素的能力,對(duì)血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應(yīng)。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM/F12+ITS-G(PB180429)+10% FBS+1% P/S(PB180120) 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達(dá)情況aldosterone; cortisol; C19 steroids |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對(duì)象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 IL3RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 ANGPTL4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 PROC1
NCI-H295R (腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 100mL CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 CAPS Buffer,0.5M,pH9.0 常溫保存 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Renin
50T 產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-defensin 129
500 mL MEM培養(yǎng)基(含1%雙抗) Cell Culture Medium -20℃保存
250mL Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB) Sucrose Gelatin Veronal Buffer (SGVB) 常溫保存 0.156-10 ng/ml 豬托克特諾病毒(TTV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
50mL Beta Glycerophosphate Solution(beta-甘油溶液),100mM Beta Glycerophosphate Solution,100mM 常溫保存
1mL EDTA溶液,0.2M EDTA Solution -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人妊娠特異性β1-糖蛋白3ELISA試劑盒
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 Rose Bengal Agar Medium 250g 7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Leukemia inhibitory factor receptor
100g 七水 Magnesium Sulfate 室溫干燥保存 0.625-40 ng/mL 人Apelin(APLN)ELISA試劑盒
500U E.coli DNA聚合 Ι E.coli DNA Polymerase I -20℃保存 78-5000 pg/mL 人酸性哺乳動(dòng)物殼多糖(AMCase)ELISA試劑盒
無(wú)菌水樣采集袋(含0.4mg) Water Aseptic Sampling Bag 100個(gè)/箱 0.312-20 ng/mL 人色素p450 2B6(CYP2B6)ELISA試劑盒
姬姆薩染色液 5ml*4 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Pantetheinase
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