參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:登革熱病毒4型(DFV-IV)核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:BJP64754
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴(kuò)增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
金合歡素;槐素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Anilofos產(chǎn)品別名: 4-甲基-5-噻唑基乙己酸酯
金蓮花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin產(chǎn)品別名: 4-甲基-5-噻唑基乙丁酸酯
金毛耳草(黃毛耳草)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium phosphate monobasic產(chǎn)品別名: N
金錢草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium phosphate monobasic產(chǎn)品別名: 1-甲基-3-苯基
金蕎麥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amberlite® XAD7HP產(chǎn)品別名: 2-氨基-3-甲酸甲酯
金雀花堿,野靛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amberlite XAD4產(chǎn)品別名: (R)-(+)-1-(4-甲氧基苯)乙
金石蠶苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: trans-Anethole產(chǎn)品別名: N,N-二(4-基)苯
金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Behenic acid產(chǎn)品別名: 3,5-二叔丁基苯
金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: tert-Butyl ethyl ether產(chǎn)品別名: 還原桃紅R
金松雙黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benzyl acetate產(chǎn)品別名: 2-氯-5-氯甲基噻吩
金鐵鎖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Bensulfuron-methyl產(chǎn)品別名: 3-氧代環(huán)丁烷基羧酸
金銀花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Benazolin-ethyl ester產(chǎn)品別名: 三乙酰基-β-環(huán)糊精
磷酸化核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 (R)-5-Hydroxymethyl Tolterodine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
N-乙?;D(zhuǎn)移酶2抗體 Topiramate-d12 質(zhì)量規(guī)格:>92.0%(T)
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 2,3-Desisopropylidene Topiramate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
孤兒核受體TAK1抗體 4,5-Desisopropylidene Topiramate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)
骨巢蛋白抗體 R-Hydroxy Topiramate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
軸突生長誘向因子5抗體 S-Hydroxy Topiramate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
磷酸化p-IκB-α抗體 D-Valacyclovir Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
G21蛋白質(zhì)抗體 Valacyclovir Impurity F 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)(T)
醌氧化還原酶抗體 Valacyclovir-d4, Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
登革熱病毒4型(DFV-IV)核酸檢測試劑盒短波單胞菌屬 DLL1(Delta-like protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas staleyi
青春雙歧桿菌 E-Cad(E-Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium adolensentis
匍枝根霉原變種 CRP(C-Reactive Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer
枯草芽孢桿菌 CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
藤黃淺藤黃鏈霉菌 RAC1(Ras Related C3 Botulinum Toxin SubstRate 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces luteolutescens
雜色曲霉 EG-VEGF(Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus versicolor
蘋果黑腐皮殼菌 PI3(Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived) ELISA Kit用途: 進(jìn)行分析檢測及抗病性鑒定,指導(dǎo)生產(chǎn)。
白地霉 GP4(Plaet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
溜曲霉 CD56(Neural Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tamarii
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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