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貨號 | BJ-X96377 |
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
L2 (大鼠肺泡上皮細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X96377 |
商品介紹:
名稱 L2 (大鼠肺泡上皮細胞) 別稱L-2 年齡(性別)成年 組織來源肺 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
大鼠 AKR1A1 基因全長ORF克隆
大鼠 KRT19 基因全長ORF克隆
大鼠 EEF1G 基因全長ORF克隆
大鼠 MRPL28 基因全長ORF克隆
大鼠 RPS18 基因全長ORF克隆
大鼠 TNNC2 基因全長ORF克隆
大鼠 HBB-B1 基因全長ORF克隆
大鼠 ODAM 基因全長ORF克隆
大鼠 CD9 基因全長ORF克隆
大鼠 TBPL1 基因全長ORF克隆
L2 (大鼠肺泡上皮細胞)50次 λ噬菌體DNAout 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Tyrosine-protein kinase Mer
50T 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒 Classical Swine Fever Virus RT-PCR Kit 低溫運輸,-20℃保存葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基進口、國產(chǎn)Dextrose Peptone Medium250克生物制品無菌試驗
100mL 核酸稀釋液,測OD專用 Diluent for NA OD Detection 常溫 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Runt-related transcription factor 2
100U 酯 Cholesterol Esterase -20℃保存
200 U 限制性內(nèi)切RsaI Restriction Endonuclease -20℃保存 0.312-20 ng/mL 人氧代固醇受體LXR-α(Oxysterols receptor LXR-alpha)ELISA試劑盒
2 ug pENTR3C pENTR3C 低溫運輸,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人載脂蛋白C-IV(Apo-CIV)ELISA試劑盒
TTC-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂 TTC Lecithin Tween80 Nutrient Agar 250g 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide
2 ug pSilencer 4.1-CMV puro pSilencer 4.1-CMV puro 低溫運輸,-20℃保存
GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基 GYP Medium 250g 0.312-20 ng/mL 人硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)ELISA試劑盒
2 ug pBoBi-GFP pBoBi-GFP 低溫運輸,-20℃保存 78-5000 pg/mL 人乙酰脂(AChE)ELISA試劑盒
1/2MS培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖) 1/2 MS Medium(without agar or sucrose) 250g
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