當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>培養(yǎng)細(xì)胞被污染清除方法
培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染,多數(shù)較難處理。在細(xì)胞培養(yǎng)中如果污染細(xì)胞價(jià)值不大,宜棄之;在尋找原因后消毒操作室,復(fù)蘇或重新購置細(xì)胞,再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。污染細(xì)胞價(jià)值較大,又難于重新得到,可采取以下辦法清除。
1、用MRA處理
用MRA(Mycoplasma Removal Agent)處理細(xì)胞,每4天換一次液,連續(xù)處理15天以確保細(xì)胞純潔健康,效果好。
2、 用清洗純化法清除支原體污染的方法
細(xì)胞營養(yǎng)馴化→細(xì)胞群的篩選→細(xì)胞清洗→反復(fù)離心洗滌。
其原理是利用離心力、細(xì)胞、微生物質(zhì)量和懸液的浮力差達(dá)到清除支原體的目的。由于支原體個(gè)體小且除發(fā)酵支原體外多為細(xì)胞外寄生,所以通過反復(fù)洗滌細(xì)胞和低速離心換液使其中潛在的支原體數(shù)量降低限。
如結(jié)合敏感抗生素的抑殺作用,可達(dá)到更好的效果。
3、藥物輔助加溫處理
細(xì)胞培養(yǎng)先用藥物處理后,再將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時(shí),可殺死支原體,但對細(xì)胞有**影響。
4、使用支原體特異性血清
用5%的兔支原體免疫血清可去除支原體污染,因特異抗體可抑制支原體生長,故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性,并且5個(gè)月后仍為陰性。
但此法比較麻煩,不如用抗生素方便、經(jīng)濟(jì)。
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