【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】近日，由山東省飼料質(zhì)量檢驗(yàn)所 、四川威爾檢測(cè)技術(shù)股份有限公司 、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所[國(guó)家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(北京)] 、帝斯曼維生素(上海)有限公司等單位起草，TC76(全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì))歸口的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃《飼料中維生素E的測(cè)定 高效液相色譜法》征求意見(jiàn)稿已編制完成，現(xiàn)公開(kāi)征求意見(jiàn)。
 

　　天然存在的維生素 E 又稱生育酚，有 8 種形式，即α、β、γ、δ生育酚和α、β、γ、δ三烯生育酚，4 種生育酚和 4 種三烯生育酚統(tǒng)稱為維生素 E，都具有維生素 E 活性，其中α-生育酚的活性最高。維生素 E 的存在，能防止生物體內(nèi)多種過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生，從而避免過(guò)氧化物的產(chǎn)生，保護(hù)好生物膜的結(jié)構(gòu)和功能。維生素 E 和硒可協(xié)同發(fā)揮作用，防止肝組織壞死和肌肉受損。維生素 E 的應(yīng)用，還能保護(hù)動(dòng)物的繁殖機(jī)能，提高動(dòng)物的免疫能力，促進(jìn)免疫球蛋白的生成。由于未酯化的生育酚很快被空氣氧化變黑色，維生素 E 主要采用的形式是較穩(wěn)定的α-生育酚乙酸酯形式。飼料添加劑品種目錄中規(guī)定的維生素 E 有三種：天然維生素 E、DL-α-生育酚、DL-α-生育酚乙酸酯，在飼料添加劑中主要以維生素 DL-α-生育酚乙酸酯的形式存在，分別為 DL-α-生育酚乙酸酯(粉)和 DL-α-生育酚乙酸酯(粉) CWS，含量均為 50%。前者生產(chǎn)工藝為維生素 E 油、二氧化硅攪拌混合，外觀為類白色或淡黃色粉末或顆粒狀粉末。后者生產(chǎn)工藝為維生素 E 油、辛烯基琥珀酸淀粉鈉乳化，噴霧干燥，外觀為白色或類白色流動(dòng)性粉末。
 

　　在通常情況下，動(dòng)物自身不能合成維生素 E 或合成量不能滿足正常生長(zhǎng)需要，必須通過(guò)日糧提供。飼料中雖然含量很低，卻是必不可少的核心物質(zhì)，因此維生素 E 是飼料質(zhì)量控制的重要指標(biāo)。另一方面，維生素 E 能夠在動(dòng)物體內(nèi)蓄積，長(zhǎng)期超量就會(huì)產(chǎn)生有害影響。因此快速準(zhǔn)確地測(cè)定飼料中維生素的含量對(duì)防止維生素缺乏癥、維生素中毒、維生素的穩(wěn)定性以及制定合理的維生素加工工藝和儲(chǔ)存條件等具有重要意義。
 

　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。
 

　　本文件代替 GB/T 17812-2008《飼料中維生素 E 的測(cè)定 高效液相色譜法》。與 GB/T 17812-2008 相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：
 

　　a)第一法皂化提取法范圍增加了精料補(bǔ)充料，直接提取法范圍增加了復(fù)合預(yù)混合飼料(見(jiàn)第 1 章，2008 年版的第 1 章)；
 

　　b)第一法皂化提取法提取劑更改為石油醚(沸程 30℃-60℃)(見(jiàn)第 4 章，2008 年版第3 章)；
 

　　c)第一法中皂化提取法增加了維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(見(jiàn) 4.2.16);
 

　　d)第一法中皂化提取法配合飼料、精料補(bǔ)充料、濃縮飼料樣品制備方法更改為試樣全部通過(guò) 1 mm 孔篩，復(fù)合預(yù)混合飼料試樣、維生素預(yù)混合飼料更改試樣裝入密閉容器，盡快測(cè)定(見(jiàn) 4.4，2008 年版中 3.5);
 

　　e)增加了固相萃取法(見(jiàn) 4.5.1.2.2)及其色譜圖；
 

　　f)增加了液相色譜參考條件(見(jiàn) 4.5.2.2)；
 

　　g)增加了定性檢測(cè)方法，定量檢測(cè)增加多點(diǎn)校正(見(jiàn)第 4 章);
 

　　h)刪除了正相色譜條件(2008 年版第 3 章);
 

　　i)更改了第一法皂化提取法中試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理(見(jiàn) 4.6，2008 年版的 3.6.2.3)
 

　　j)增加了第二法直接提取法中維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(見(jiàn) 5.2.5)；
 

　　k)更改了第二法直接提取法中試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理(見(jiàn) 5.6，2008 年版的 4.6.2.3)
 

　　l)增加第一法皂化法提取法維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖(見(jiàn)附錄 A)，增加第二法直接提取法 dl-α-生育酚乙酸酯的液相色譜圖(見(jiàn)附錄 B)。
 

　　本文件描述了飼料中維生素E的高效液相色譜測(cè)定方法。本文件中“第一法 皂化提取法”適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補(bǔ)充料、復(fù)合預(yù)混合飼料和維生素預(yù)混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚)的測(cè)定，“第二法 直接提取法”適用于維生素預(yù)混合飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)的測(cè)定。
 

　　本文件“第一法 皂化提取法”的定量限為1mg/kg，“第二法 直接提取法”的定量限為20mg/kg。
 

　　第一法 皂化提取法
 

　　原理：
 

　　試樣用堿溶液皂化后，經(jīng)液液萃取或固相萃取凈化后，用高效液相色譜儀分離測(cè)定，外標(biāo)法定量。
 

　　儀器和設(shè)備：
 

　　1.高效液相色譜儀：配有紫外吸收檢測(cè)器(或二極管矩陣檢測(cè)器)；
 

　　2.分析天平：精度為0.01mg 和0.1mg。
 

　　3.回流裝置：圓底燒瓶和冷凝管。
 

　　4.恒溫水浴，控溫精度 ± 2 ℃。
 

　　5.旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
 

　　6.離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于 10 000 r/min。
 

　　7.固相萃取裝置。
 

　　8.氮吹儀：帶加熱裝置，溫度可控制在(50±2)℃。
 

　　9.渦旋混合器。
 

　　第二法 直接提取法
 

　　原理：
 

　　維生素預(yù)混合飼料、復(fù)合預(yù)混合飼料中維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)用甲醇溶液提取，試液注入高效液相色譜色譜柱，用紫外檢測(cè)器(或二極管陣列檢測(cè)器)在285nm 處測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算維生素 E(dl-α-生育酚乙酸酯)含量。
 

　　儀器設(shè)備：
 

　　1.高效液相色譜儀：配有二極管矩陣檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器。
 

　　2.分析天平，精度為0.0001g 和0.00001g。
 

　　3.超聲波清洗器：頻率不低于35000Hz。
 

　　維生素 E 是飼料質(zhì)量控制的重要指標(biāo)。修訂飼料中維生素 E 測(cè)定國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，對(duì)于規(guī)范飼料原料生產(chǎn)，提高產(chǎn)品質(zhì)量和安全水平，加強(qiáng)飼料質(zhì)量安全監(jiān)管，保障我國(guó)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全，確保人民身體健康，推動(dòng)畜牧產(chǎn)業(yè)和畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)快速健康發(fā)展，有十分重要的意義。
 

　　更多詳情請(qǐng)見(jiàn)附件。