【儀表網(wǎng) 行業(yè)標準】按照寧夏化學分析測試協(xié)會團體標準工作程序，標準起草組已完成《枸杞葉及枸杞茶中黃酮類化合物的測定》團體標準征求意見稿的編制工作?，F(xiàn)按照寧夏化學分析測試協(xié)會《團體標準制修訂程序》要求，公開征求意見。請有關單位及專家提出寶貴意見，并將征求意見表于2023年2月28日前反饋給秘書處。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020 給出的規(guī)則起草。本文件由寧夏化學分析測試協(xié)會歸口。本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)藥品檢驗研究院(國家枸杞產(chǎn)品質量檢驗檢測中心(寧夏))、中國科學院蘭州化學物理研究所、寧夏食品藥品檢驗研究院。
 

　　本文件規(guī)定了枸杞葉及枸杞茶中總黃酮含量的分光光度計測定方法和枸杞葉及枸杞茶中黃酮類化合物含量的高效液相色譜測定方法。本文件適用于枸杞葉及枸杞茶中總黃酮及黃酮類化合物含量的測定。
 

　　原理：
 

　　試樣中的黃酮類化合物的分子結構上具有鄰二酚羥基，可以在弱堿性條件下與鋁鹽絡合，形成穩(wěn)定的紅色化合物，在可見光區(qū)域(510 nm)顯色。在一定濃度范圍內，該化合物的吸光度值與總黃酮含量成正比，符合郎伯-比爾定律。
 

　　儀器與設備：
 

　　1.紫外分光光度計。
 

　　2.分析天平，感量0.00001g。
 

　　3.粉碎機。
 

　　4.超聲波清洗器。
 

　　5.超純水機。
 

　　6.水浴鍋。
 

　　試樣制備：
 

　　取枸杞葉(枸杞茶)樣品，粉碎，過3號篩，置干燥器中保存，待用。取枸杞葉(枸杞茶)約1g(精確至0.0001g)，置三角瓶中，加50 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)冷浸30 min，水浴回流提取1h，濾過，分取濾液，藥渣再加30 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)，水浴回流提取1h，過濾，合并濾液，用乙醇溶液(5.2.2)洗滌濾渣并定容至100mI的量瓶中.搖勻，作為試液，待用。
 

　　標準曲線的繪制：
 

　　精密吸取蘆丁標準儲備液(5.4)0mL、0.1mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL 置于 10mL 容量瓶中，分別加水使成 2.4 mL，各加 5%亞硝酸鈉溶液(5.2.3)0.4 mL，搖勻，放置 6 min，加 10%硝酸鋁溶液(5.2.4)0.4 mL，搖勻，放置 6 min，加 4%氫氧化鈉溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，搖勻，放置 15 min，以相應試劑作空白，在 510 nm 波長處測定吸光度值，以蘆丁質量濃度ρ(ug/mL)為橫坐標，相應的吸光度值 A 為縱坐標，繪制標準曲線，得到標準曲線回歸方程。
 

　　測定步驟：
 

　　精密量取(7)待測液1.0mL，加5%亞硝酸鈉溶液(5.2.3)0.4 mL，搖勻，放置6 min，加10%硝酸鋁溶液(5.2.4)0.4 mL，搖勻，放置6 min，加4%氫氧化鈉溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，搖勻，放置15 min，試樣于波長509 nm處測定，以測得吸光值由標準曲線查的試樣待測液中總黃酮的含量，同時做空白實驗。
 

　　精密度：
 

　　在重復性條件下，獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不超過算術平均值的10%。