【儀表網(wǎng) 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)】按照寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)工作程序，標(biāo)準(zhǔn)起草組已完成《枸杞葉及枸杞茶中黃酮類化合物的測(cè)定》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿的編制工作?，F(xiàn)按照寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)《團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制修訂程序》要求，公開征求意見。請(qǐng)有關(guān)單位及專家提出寶貴意見，并將征求意見表于2023年2月28日前反饋給秘書處。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020 給出的規(guī)則起草。本文件由寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié)會(huì)歸口。本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院(國(guó)家枸杞產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心(寧夏))、中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所、寧夏食品藥品檢驗(yàn)研究院。
 

　　本文件規(guī)定了枸杞葉及枸杞茶中總黃酮含量的分光光度計(jì)測(cè)定方法和枸杞葉及枸杞茶中黃酮類化合物含量的高效液相色譜測(cè)定方法。本文件適用于枸杞葉及枸杞茶中總黃酮及黃酮類化合物含量的測(cè)定。
 

　　原理：
 

　　試樣中的黃酮類化合物的分子結(jié)構(gòu)上具有鄰二酚羥基，可以在弱堿性條件下與鋁鹽絡(luò)合，形成穩(wěn)定的紅色化合物，在可見光區(qū)域(510 nm)顯色。在一定濃度范圍內(nèi)，該化合物的吸光度值與總黃酮含量成正比，符合郎伯-比爾定律。
 

　　儀器與設(shè)備：
 

　　1.紫外分光光度計(jì)。
 

　　2.分析天平，感量0.00001g。
 

　　3.粉碎機(jī)。
 

　　4.超聲波清洗器。
 

　　5.超純水機(jī)。
 

　　6.水浴鍋。
 

　　試樣制備：
 

　　取枸杞葉(枸杞茶)樣品，粉碎，過(guò)3號(hào)篩，置干燥器中保存，待用。取枸杞葉(枸杞茶)約1g(精確至0.0001g)，置三角瓶中，加50 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)冷浸30 min，水浴回流提取1h，濾過(guò)，分取濾液，藥渣再加30 mL 70%的乙醇溶液(5.2.2)，水浴回流提取1h，過(guò)濾，合并濾液，用乙醇溶液(5.2.2)洗滌濾渣并定容至100mI的量瓶中.搖勻，作為試液，待用。
 

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：
 

　　精密吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(5.4)0mL、0.1mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL 置于 10mL 容量瓶中，分別加水使成 2.4 mL，各加 5%亞硝酸鈉溶液(5.2.3)0.4 mL，搖勻，放置 6 min，加 10%硝酸鋁溶液(5.2.4)0.4 mL，搖勻，放置 6 min，加 4%氫氧化鈉溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，搖勻，放置 15 min，以相應(yīng)試劑作空白，在 510 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，以蘆丁質(zhì)量濃度ρ(ug/mL)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度值 A 為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。
 

　　測(cè)定步驟：
 

　　精密量取(7)待測(cè)液1.0mL，加5%亞硝酸鈉溶液(5.2.3)0.4 mL，搖勻，放置6 min，加10%硝酸鋁溶液(5.2.4)0.4 mL，搖勻，放置6 min，加4%氫氧化鈉溶液(5.2.5)1 mL，加水至刻度，搖勻，放置15 min，試樣于波長(zhǎng)509 nm處測(cè)定，以測(cè)得吸光值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查的試樣待測(cè)液中總黃酮的含量，同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。
 

　　精密度：
 

　　在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過(guò)算術(shù)平均值的10%。