【儀表網(wǎng) 儀表標(biāo)準(zhǔn)】根據(jù)《工業(yè)和信息化部辦公廳關(guān)于印發(fā)2020第三批行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制修訂和外文版項(xiàng)目計(jì)劃的通知》(工信廳科函〔20203263號(hào))，《乳制品中乳糖的測(cè)定-核磁共振波譜法》被列入制定工作計(jì)劃，項(xiàng)目編號(hào)為2020-1733T-QB。由全國(guó)特殊食品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。起草工作組按照標(biāo)準(zhǔn)制定工作程序，組織完成了本標(biāo)準(zhǔn)的征求意見(jiàn)稿，現(xiàn)向有關(guān)行業(yè)部門(mén)、協(xié)會(huì)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、科研、檢測(cè)和用戶等單位廣泛征求意見(jiàn)。
 

　　目前乳品中乳糖含量的檢測(cè)主要采用國(guó)標(biāo)GB 5413.5-2010，即萊因—埃農(nóng)氏法(滴定法)和高效液相色譜法，另外還有分光光度法、酶電極法、酶-比色法以及近紅外光譜法等。萊茵-埃農(nóng)氏法(滴定法)所使用的試劑具有一定腐蝕性且對(duì)操作人員的操作技能要求較高，耗時(shí)長(zhǎng)、操作繁瑣，滴定終點(diǎn)肉眼不易判斷，易產(chǎn)生誤差，結(jié)果不太準(zhǔn)確。直接滴定法應(yīng)用于復(fù)雜乳制品基質(zhì)中存在多種還原糖的情況下，測(cè)定結(jié)果在一定程度上會(huì)受到干擾，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性不足。高效液相色譜法雖然可以避免還原糖對(duì)于檢測(cè)的干擾，但其顯著缺點(diǎn)是耗時(shí)長(zhǎng)、分析成本較高、示差折光檢測(cè)器的選擇性、重復(fù)性和穩(wěn)定性不足，尤其對(duì)于乳制品復(fù)雜基質(zhì)中乳糖的分析較為困難。分光光度法雖然靈敏度較高，但對(duì)檢測(cè)條件的要求比較嚴(yán)格，樣品需在堿性條件下起顯色反應(yīng)，操作繁瑣。酶電極法分析比較容易受葡萄糖、蔗糖等其它還原糖糖類(lèi)的干擾。酶-比色法靈敏度較高，但顯著缺點(diǎn)是測(cè)定時(shí)間長(zhǎng)，時(shí)效性難以保證，不易推廣。近紅外光譜法需要大量樣本建立預(yù)測(cè)模型，建立模型過(guò)程比較復(fù)雜，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，且操作人員需要具備較強(qiáng)的數(shù)據(jù)分析建模能力；此外，由于水分子對(duì)紅外具有較強(qiáng)的吸收，會(huì)在一定程度上干擾液體樣品的檢測(cè)，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性不足。綜上所述：亟需開(kāi)發(fā)一種能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)乳制品中乳糖含量進(jìn)行快速、準(zhǔn)確且高效的定量方法。
 

　　本文件按照 GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1 部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。參考GB/T 6682—2008 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法；JY/T 0578—2020 超導(dǎo)脈沖傅里葉變換核磁共振波譜測(cè)試方法通則；JJF 1448—2014 超導(dǎo)脈沖傅里葉變換核磁共振譜儀校準(zhǔn)規(guī)范等技術(shù)文件編制而成。
 

　　本文件描述了乳制品中乳糖的測(cè)定方法——核磁共振波譜法。 本文件適用于采用核磁共振波譜法測(cè)定乳制品中的乳糖，包括牛奶、發(fā)酵乳、奶片、奶酪、奶粉中乳糖的測(cè)定。
 

　　方法原理：
 

　　在充分弛豫條件下，一維核磁共振波譜譜峰的積分面積與樣品中所對(duì)應(yīng)的自旋核的數(shù)目成正比。同時(shí)基于核磁共振信號(hào)強(qiáng)度(峰面積)互易原理，即給定線圈中核磁共振信號(hào)強(qiáng)度與90°脈沖寬度成反比，分別測(cè)定外標(biāo)參考物質(zhì)和待測(cè)樣品的一維核磁共振氫譜(1H NMR)及90°脈沖寬度，采用外標(biāo)法測(cè)定樣品中乳糖的含量。
 

　　儀器設(shè)備：
 

　　1.核磁共振波譜儀：氫(1H)共振頻率不低于400 MHz；可控溫，溫度精度不低于±0.1 K。2.核磁共振樣品管：外徑5 mm，同心且均勻。3.分析天平：感量為0.1 mg和1 mg。4.旋渦震蕩儀。5.pH計(jì)：精度為± 0.01。6.移液器：量程為10 μL～100 μL和100 μL～1 000 μL。7.水系微孔過(guò)濾膜：孔徑0.45 μm。8.離心機(jī)：離心速度≥ 8 000 r/min。
 

　　上機(jī)測(cè)定參考條件：
 

　　1.核磁共振樣品管不旋轉(zhuǎn)。2.檢測(cè)溫度：(300.0± 0.1)K。3.空掃次數(shù)：4次。4.掃描次數(shù)：64次。5.譜寬：8 000 Hz。6.采樣點(diǎn)數(shù)：65 536。7.接收增益：16。8.弛豫延遲時(shí)間：≥4 s。9.水峰壓制脈沖序列：預(yù)飽和加相位循環(huán)。
 

　　上機(jī)測(cè)定：
 

　　1.按照J(rèn)Y/T 0578—2020的規(guī)定對(duì)探頭溫度進(jìn)行校正；按照J(rèn)JF 1448—2014的規(guī)定對(duì)1H譜靈敏度、分辨力、線性、1H譜定量重復(fù)性進(jìn)行校準(zhǔn)。2.將裝有上機(jī)樣品(7.1.3)的核磁共振樣品管置于核磁共振儀檢測(cè)腔內(nèi)，設(shè)置樣品管不旋轉(zhuǎn)。3.設(shè)置待測(cè)樣品溫度為300.0 K，測(cè)樣前需要等待樣品溫度穩(wěn)定。4.新建氫譜標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)文件。5.鎖場(chǎng)與調(diào)諧。6.勻場(chǎng)。7.測(cè)定樣品的90°脈沖寬度，并記錄結(jié)果。8.調(diào)用有相位循環(huán)的預(yù)飽和水峰壓制脈沖序列。9.在7.2條件下設(shè)定參數(shù)，根據(jù)記錄結(jié)果(7.3.7)設(shè)定90°脈沖寬度，根據(jù)水峰壓制效果優(yōu)化水峰壓制位置、壓制功率等，保持各樣品接收器增益值一致。
 

　　本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，將解決目前乳制品中乳糖含量測(cè)定方法標(biāo)準(zhǔn)不足的問(wèn)題，規(guī)范了乳制品行業(yè)生產(chǎn)，為國(guó)內(nèi)外銷(xiāo)售及開(kāi)展對(duì)外技術(shù)、經(jīng)濟(jì)交流提供檢測(cè)依據(jù)。同時(shí)，有利于消費(fèi)者選擇適合的產(chǎn)品，保障我國(guó)乳制品保持健康有序的發(fā)展。在推動(dòng)和指導(dǎo)乳制品開(kāi)發(fā)、產(chǎn)業(yè)升級(jí)發(fā)展方面具有重要社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。