大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶ELISA試劑盒
編號:JM22337E
英文名稱:Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA KIT
檢測程序
1. 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線:設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔8孔,每孔中各加入樣品稀釋液100ul,*孔加標(biāo)準(zhǔn)品100ul,混勻后用加樣器吸出100ul,移至第二孔。如此反復(fù)作對倍稀釋至第六孔,zui后,從第六孔中吸出100ul棄去。第七孔為空白對照,第八孔為零孔。
2. 加樣:待測品孔每孔各加入待測樣品100ul混勻。
3. 將反應(yīng)板充分混勻后粘上封板紙置37 oC 120分鐘。
4. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。
5. 每孔(除零孔)加*抗體工作液50ul,置37℃ 60分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔(除零孔)加酶標(biāo)抗體工作液100ul(兩滴),將反應(yīng)板置37 oC 60分鐘。
8. 洗板:同前。
9. 每孔加入底物液A、B各一滴,置37 oC避光反應(yīng)15分鐘。
10. 每孔加入1滴終止液混勻。
11. 在450nm處測吸光值。
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