產(chǎn)品名稱 | 貨號 | AXB9883 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | SUP-b15：SUPb15 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | Sup-B15 |
年齡（性別） | 8歲 |
組織來源 | 骨髓；急性淋巴母細(xì)胞白血?。?/span>B淋巴母細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | SUP-B15細(xì)胞來源于一位B細(xì)胞全部為費城染色體陽性的8歲小孩的骨髓。SUP-B15細(xì)胞表達多個B細(xì)胞標(biāo)記，但不表達T細(xì)胞標(biāo)記。β-2微球蛋白、Leu12、My7(CD13)、OKT9(CD71)、OKT10(CD38)及CALLA(CD10)抗體陽性。CB1、Leu1(CD5)、Leu2(CD8)、Leu3(CD4)、Leu4(CD3)、Leu5(CD2)、Leu6(CD1a)、Leu9、LeuM1(CD15)、My9(CD33)、表面抗原(sIg-)及Epstein-Barr病毒陰性。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | IMDM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋20% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~20-60 hours |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
抗原表達情況 | CD1a -; CD2 -; CD3 -; CD4 -; CD5 -; CD8 -; CD10+; CD13+; CD38+; CD71+; HLA DR+ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
跨膜蛋白48 英文名；NDC1APC標(biāo)記小鼠CD22單克隆抗體 英文名；mouse CD22/APC
跨膜蛋白49抗體 英文名；TMEM49APC標(biāo)記小鼠CD23單克隆抗體 英文名；mouse CD23/APC
跨膜蛋白4超家族成員3抗體 英文名；TM4SF3APC標(biāo)記小鼠CD24單克隆抗體 英文名；mouse CD24/APC
跨膜蛋白59抗體 英文名；TMEM59APC標(biāo)記小鼠CD25單克隆抗體 英文名；Mouse CD25(IL2RA)/APC
跨膜蛋白59樣蛋白抗體 英文名；TMEM59LAPC標(biāo)記小鼠CD274單克隆抗體 英文名；mouse CD274/APC
跨膜蛋白62抗體 英文名；TMEM62APC標(biāo)記小鼠CD31單克隆抗體 英文名；mouse CD31/APC
跨膜蛋白66抗體 英文名；TMEM66APC標(biāo)記小鼠CD38單克隆抗體 英文名；mouse CD38/APC
跨膜蛋白67抗體 英文名；TMEM67/MeckelinAPC標(biāo)記小鼠CD3e單克隆抗體 英文名；Mouse CD3e/APC
人Ph+急淋白血病細(xì)胞系;SUP-b15跨膜蛋白6超家族成員1抗體 英文名；TM6SF1APC標(biāo)記小鼠CD40單克隆抗體 英文名；mouse CD40/APC
跨膜蛋白70抗體 英文名；TMEM70APC標(biāo)記小鼠CD44單克隆抗體 英文名；mouse CD44/APC
跨膜蛋白74抗體 英文名；TMEM74APC標(biāo)記小鼠CD45.1單克隆抗體 英文名；mouse CD45.1/APC
跨膜蛋白76/TMEM76抗體 英文名；HGSNATAPC標(biāo)記小鼠CD45.2單克隆抗體 英文名；mouse CD45.2/APC
跨膜蛋白85抗體 英文名；TMEM85APC標(biāo)記小鼠CD45R單克隆抗體 英文名；mouse CD45R/APC
跨膜蛋白87A抗體 英文名；TMEM87AAPC標(biāo)記小鼠CD45單克隆抗體 英文名；mouse CD45/APC
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
