公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | AXB10310 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | SNU-5:SNU5 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹:
別稱 | SNU5 |
年齡(性別) | 33歲 |
組織來源 | 胃;源自轉(zhuǎn)移部位:腹水 |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情介紹 | SNU-5細(xì)胞來源于一名低分化胃癌患者的轉(zhuǎn)移性腹水,是于1987年分離建立;SNU-5細(xì)胞表達(dá)CEA和TAG-72。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | IMDM+20% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~34 hours |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
致瘤性 | Yes, the cells have a reported colony forming efficiency of 27% in semisolid medium. |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
跨膜蛋白SEMA4D抗體 英文名;SEMA4DAPC標(biāo)記小鼠NK1.1單克隆抗體 英文名;mouse NK1.1/APC
跨膜蛋白SEMA4F抗體 英文名;SEMA4FApollon凋亡抑制蛋白抗體 英文名;BIRC6
跨膜蛋白SEMA4G抗體 英文名;SEMA4GAPP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 英文名;Amyloid Precursor Protein
跨膜蛋白SEMA5A抗體 英文名;Semaphorin 5AAPS抗體 英文名;APS
跨膜蛋白SEMA5B抗體 英文名;Semaphorin 5BAPXL蛋白抗體 英文名;APXL
跨膜蛋白Smoothened抗體 英文名;SMOA-Raf 重組兔單克隆抗體 英文名;A-RAF
跨膜蛋白STT3A抗體 英文名;STT3AA-Raf抗體 英文名;A Raf
跨膜蛋白TMBIM1抗體 英文名;TMBIM1ARC1抗體 英文名;Arc1
人胃癌細(xì)胞;SNU-5跨膜蛋白TMED4抗體 英文名;TMED4ARCH抗體 英文名;ZBTB8OS/ARCH
跨膜蛋白TMEM176B抗體 英文名;TMEM176BARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 英文名;BIG1
跨膜蛋白TMPPE抗體 英文名;TMPPEARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 英文名;ARMCX1
跨膜蛋白超家族9-1抗體 英文名;TM9SF1ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體 英文名;ARMCX3
跨膜和泛素樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 英文名;TMUB1ARSA單克隆抗體 英文名;ARSA
跨膜和卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 英文名;TMCC1Artemin抗體 英文名;Artemin
跨膜和卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 英文名;TMCO3ASCL2蛋白抗體 英文名;ASCL2
跨膜接頭蛋白PAG抗體 英文名;PAG1ASH1蛋白抗體 英文名;ASH1L
跨膜接頭蛋白SIT抗體 英文名;SITASMTL蛋白抗體 英文名;ASMTL