產(chǎn)品名稱 | 貨號 | AXB9872 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | IMR-90：IMR90 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
商品介紹：
別稱 | IMR 90 |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 女性，16周齡 |
組織來源 | 肺 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | IMR-90細(xì)胞是由W·W·Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材建立的人二倍體成纖維細(xì)胞株。分裂潛能、病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究，因而這株細(xì)胞可以作為WI-38或其它標(biāo)準(zhǔn)人肺細(xì)胞株的替代株。有報(bào)道稱，IMR-90細(xì)胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | MEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
注意事項(xiàng) | 該細(xì)胞為有限傳代細(xì)胞系，請注意代次控制。 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時(shí)間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
雙微體2癌基因結(jié)合蛋白抗體 英文名；MDM2BPPacific Blue標(biāo)記人CD107a單克隆抗體 英文名；human CD107b/Pacific Blue
雙微體2癌基因抗體 英文名；MDM2Pacific Blue標(biāo)記人CD11b單克隆抗體 英文名；human CD11b/Pacific Blue
雙向染色體細(xì)胞分裂蛋白1抗體 英文名；BOD1Pacific Blue標(biāo)記人CD11c單克隆抗體 英文名；human CD11c/Pacific Blue
雙氧化酶1/甲狀腺氧化酶1抗體 英文名；DUOX1Pacific Blue標(biāo)記人CD127 (IL7R)單克隆抗體 英文名；human CD127 (IL7R)/Pacific Blue
雙氧化酶2/甲狀腺氧化酶2抗體 英文名；DUOX2Pacific Blue標(biāo)記人CD14單克隆抗體 英文名；human CD14/Pacific Blue
雙氧化酶成熟因子抗體 英文名；DUOXA1Pacific Blue標(biāo)記人CD154單克隆抗體 英文名；human CD154/Pacific Blue
雙氧化酶激活因子2抗體 英文名；DUOXA2Pacific Blue標(biāo)記人CD15單克隆抗體 英文名；human CD15 (SSEA-1)/Pacific Blue
雙重特異性磷酸酶27抗體 英文名；DUSP27Pacific Blue標(biāo)記人CD16單克隆抗體 英文名；human CD16/Pacific Blue
人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體 英文名；Os05g0477200 proteinPacific Blue標(biāo)記人CD25單克隆抗體 英文名；human CD25/Pacific Blue
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 英文名；ABHD13Pacific Blue標(biāo)記人CD33單克隆抗體 英文名；human CD33/Pacific Blue
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白14B抗體 英文名；ABHD14BPacific Blue標(biāo)記人CD38單克隆抗體 英文名；human CD38/Pacific Blue
水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體 英文名；ABHD15Pacific Blue標(biāo)記人CD44單克隆抗體 英文名；human CD44/Pacific Blue
水通道蛋白0抗體 英文名；AQP0Pacific Blue標(biāo)記人CD56 (NCAM)單克隆抗體 英文名；human CD56 (NCAM)/Pacific Blue
水通道蛋白1抗體 英文名；AQP1Pacific Blue標(biāo)記人CD57單克隆抗體 英文名；human CD57/Pacific Blue
水通道蛋白-2抗體 英文名；AQP2Pacific Blue標(biāo)記人CD9單克隆抗體 英文名；human CD9/Pacific Blue
水通道蛋白-3抗體 英文名；AQP3Pacific Blue標(biāo)記人HLA-DR單克隆抗體 英文名；human HLA-DR/Pacific Blue
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
