公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
| 產(chǎn)品名稱 | 5637 (人膀胱癌細(xì)胞) | 貨號 | A01X627 |
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名稱 | 5637:5637 |
| 分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹：
| 鑒定 | (STR鑒定正確) |
| 種屬 | 人 |
| 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
| 凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)方案A（默認(rèn)） | 生長培養(yǎng)基: RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S培養(yǎng)條件: 氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃ |
| 推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
| 注意事項 | 該細(xì)胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細(xì)胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊，細(xì)胞可以滑落方可終止消化。 |
| 背景描述 | 5637細(xì)胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 |
| 年齡（性別） | 男性；68歲 |
| 組織來源 | 膀胱；癌 |
| 細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
| 腫瘤類型 | 膀胱癌細(xì)胞 |
| 生物安全等級 | BSL-1 |
| 倍增時間 | ~24-36 hours |
| 致瘤性 | Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
| 保藏機(jī)構(gòu) | ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35 |
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞 | One-Step Firefly Luciferase Assay Kit（一步法螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒） |
| CoC1人卵巢癌細(xì)胞 | D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽） |
| COLO205人結(jié)腸癌細(xì)胞 | D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽） |
| COLO320人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽） |
| COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽） |
| COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒 |
| COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒 |
| CW-2人結(jié)腸癌細(xì)胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒（即用型） |
| cx-1結(jié)腸癌細(xì)胞 | WonderOrange 蛋白定量試劑盒 |
| D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | WonderOrange 蛋白定量試劑盒 |
| D341 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 麗春紅染色液(1×) |
| DAMI人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | 考馬斯亮藍(lán)快速染色液（免脫色） |
| DAOY人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | Western及IP細(xì)胞裂解液 |
| DAUDI人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 | RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑） |
| DB人彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | RIPA裂解液（強(qiáng)，無抑制劑） |
| DLD-1人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×） |
| DMS 53人肺癌細(xì)胞 | 磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×） |
| DMS 114人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 5637 (人膀胱癌細(xì)胞)蛋白酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100× in DMSO） |
