TSKgel Protein C4-300是一款適合于蛋白分析的反相色譜柱。采用3µm的硅膠填料,通過對(duì)孔徑、固定相配體的烷基鏈長(zhǎng)及表面鍵合密度的優(yōu)化,可實(shí)現(xiàn)高分辨率和高回收率的分析。溫度對(duì)分析結(jié)果的影響比較大,測(cè)定時(shí)溫度越高,分辨率也越高。在蛋白分析中,使用0.05%的TFA或5mmol/L的高氯酸作為離子對(duì)試劑,是比較合適的。
TSKgel Protein C4-300與其他色譜分離模式(尺寸排阻、離子交換)相結(jié)合,可以獲得關(guān)于蛋白質(zhì)、多肽樣品的更多信息。
TSKgel Protein C4-300 色譜柱基本信息
色譜柱基質(zhì) | 硅膠 |
平均粒徑 | 3 µm |
孔徑 | 300Å |
比表面積 | 100 m2/g |
表面官能團(tuán) | C4(丁基) |
封端 | 有(三甲基硅烷) |
碳含量 | 3% |
色譜柱尺寸 | 4.6 mmI.D. ×5 cm、10 cm、15 cm |
保護(hù)柱 | 3.2 mmI.D. ×1.5 cm |
TSKgel Protein C4-300色譜柱的主要特點(diǎn):
1、高分辨率
采用了3µm粒徑的硅膠→更高的理論塔板數(shù);
孔徑為30nm→非常適合于蛋白質(zhì)分離的孔徑尺寸。
2、高回收率
優(yōu)化了固定相配體的烷基鏈長(zhǎng)度以及表面密度→抑制了蛋白質(zhì)的吸附。
鍵合官能團(tuán)烷基鏈長(zhǎng)的優(yōu)化
通過優(yōu)化官能團(tuán)表面鍵合密度,不僅提高了該產(chǎn)品的分辨率,同時(shí)也提高了新色譜柱的使用壽命。
蛋白質(zhì)的分析實(shí)例(單克隆抗體的分析)
利用木瓜蛋白酶(蛋白消化酶)酶解鼠源單克隆抗體使其片段化,并通過尺寸排阻色譜法(SEC)及反相色譜法(RPC)進(jìn)行分析。
分析結(jié)果:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:即使在SEC分析的同一組分(100 kDa、50 kDa)中,仍然含有多 種疏水性不同的組分。