TOSOH公司的尺寸排除色譜(SEC)的兩種方式(GFC 凝膠過濾色譜、GPC 凝膠滲透色譜)水相體系GFC采用硅膠基的TSK-GEL SW 和聚合物基的TSK-GEL PW兩種色譜柱。
SW和SWXL色譜柱特點:
·SW型適合分離蛋白質(zhì)多肽。該類柱子多次在各種文獻中出現(xiàn)。應用很廣。
·SW類型的柱子填料是剛性的球形硅膠鍵合親水化合物構(gòu)成的。
·SW類型柱子能滿足SEC對填料要求。即低吸附,孔徑分布均勻和一致。
分離不同分子量蛋白推薦的流動相和色譜柱
樣品分子量 | 推薦柱 | 流動相 |
5×103 - 1×105 | TSK-GEL G2000SWXL/SW/Super SW2000 | 0.1M Na SO4在0.05-0.1M 磷酸鹽溶液中pH 7.0 |
1×104 - 5×105 | TSK-GEL G3000SWXL/SW/Super SW3000 | |
2×104 - 7×106 | TSK-GEL G4000SWXL/SW |
下圖顯示是以確定分子量的聚乙二醇、葡聚糖和蛋白質(zhì)樣品做的校正曲線。
上面是用SW型色譜柱(10μ,13μ)做的校正曲線,而下面是用SWXL(5μ,8μ)和SUPER SW(4μ)型色譜柱做的校正曲線。
下圖是用 TSK –gel 2000SWXL 分析四個標樣
1 核糖核酸酶
2 胰島素
3 α1
4 生長激素的譜圖。流動相為40%乙腈+60%三氟醋酸(0.05%水溶液)
TSK GEL 凝膠過濾色譜柱選擇指南
樣品 | 柱選擇標準 | 選擇原則 | |||
選擇 | 備選 | ||||
碳水化合物 | 多糖 | TSKgel GMPWXL | G5000PWXL 和 G3000PWXL | 大孔徑、線性工作曲線 | |
小顆粒、高分辨率 | |||||
寡糖 | TSKgel G-Olige-PW | G2500PWXL | 小顆粒、高分辨率 | ||
核酸 | DNA片段 | 大型 | TSKgel G-DNA-PW | - | 大孔徑、小顆粒、高分辨率 |
TSKgel G5000PWXL | |||||
中型和小型 | TSKgel G4000SWXL | - | 合適的孔徑 | ||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW3000, | |||||
or G3000 SWXL /SW | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
RNA | TSKgel G4000SWXL | - | 合適的孔徑 | ||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW3000 | |||||
G3000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
寡核苷酸 | TSKgel G2500PWXL | - | 小孔徑、離子化作用 | ||
蛋白質(zhì) | 一般尺寸 ?。行偷鞍踪|(zhì) | TSKgel Super SW3000 | G3000PWXL 或 G4000PWXL | 小顆粒 小到中型范圍的孔徑 | |
G3000 SWXL /SW | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
TSKgel G4000SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G4SWXL | |||||
TSKgel Super SW2000 | |||||
G2000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G2SWXL | |||||
大蛋白質(zhì) | 低密度脂蛋白 | TSKgel G6000PWXL | - | 大孔徑 | |
TSKgel G5000PWXL | |||||
明膠 | TSKgel GMPWXL | G5000PWXL 和 G3000PWXL | 大孔徑 線性工作曲線 | ||
肽 | 大型 | TSKgel Super SW3000 | SuperSW2000或G3000PWXL | 小到中型范圍的孔徑,多用途 | |
G3000 SWXL | |||||
TSKgel BioAssist G3SWXL | |||||
or G2000 SWXL | |||||
TSKgelBioAssist G2SWXL | |||||
小型 | TSKgel G2500PWXL | SuperSW2000或 G2000 SWXL /SW | 線性工作曲線 高分辨率 | ||
病毒 | TSKgel G6000PWXL 或 TSKgel G5000PWXL | - | 大孔、高分辨率 | ||
合成多聚物 | TSKgel GMPWXL 或 TSKgel Alpha-M | G5000PWXL 和 G3000PWXL 或 Alpha-5000和 Alpha-3000 | 大孔徑、低吸收,線性工作曲線 | ||
合成寡聚物 | 非離子和陽離子 |
| TSKgel G-Olige-PW | G2500PWXL 或 SuperAW2500 | 小孔徑,高分辨率 |
TSKgel G2500PWXL 或 TSKgel Alpha-2500 | |||||
陰離子 | TSKgel G2500PWXL | G2500PWXL 或 SuperAW2500 | 小孔徑,離子化作用 | ||
TSKgel Alpha-2500 |