一、檢測(cè)原理

　　在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下，酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類(lèi)似物（碘化硫代乙酰ATCI或碘化硫代丁酰BTCI）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測(cè)試儀在412nm處測(cè)定吸光度的變化值（△A），計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的存在。

農(nóng)殘速測(cè)試劑 適合農(nóng)殘測(cè)試儀使用

緩 沖 劑 每包加500mL蒸餾水或純凈水溶解 常溫存放
酯酶 不用配制，直接取用 4℃冰箱保存 每份加100μL
顯 色 劑 每瓶加26mL緩沖液溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL
底 物 每瓶加10.3mg蒸餾水或純凈水溶解 4℃冰箱保存 每份加100μL

　　使用方法：請(qǐng)按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199-2003操作，或根據(jù)農(nóng)藥殘留測(cè)試儀的使用說(shuō)明進(jìn)行測(cè)試。

二、使用方法

（一）試劑準(zhǔn)備：

　　1、取緩沖溶液試劑1袋，加入500ml蒸餾水或純凈水，溶解攪拌均勻，即得pH8.0緩沖溶液。
　　2、酶試劑已配成溶液可直接使用。使用時(shí)每次100μL。
　　3、在顯色劑瓶中加入Ph8.0緩沖溶液26毫升，輕搖使*溶解。使用時(shí)每次100μL。
　　4、在底物瓶中加入蒸餾水10.3毫升，輕搖使*溶解。使用時(shí)每次100μL。

（二）、樣品準(zhǔn)備：

　　樣品不可用水沖洗，應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性，葉菜一般取來(lái)自不同植株的葉尖部樣本；果菜從不同個(gè)體的表皮處取樣。
　　稱取切碎或剪碎至1厘米見(jiàn)方左右的樣本2.0克于小燒杯（或小三角瓶等其他容器）中，加入10毫升Ph8.0緩沖溶液，振蕩振搖1分鐘或靜置3分鐘，過(guò)濾或靜置取上清液。

（三）測(cè)試：

　　空白對(duì)照測(cè)試：在小試管內(nèi)先加入100μL酶，然后加入2.5毫升pH8.0緩沖溶液，100μL顯色劑，100μL底物，搖勻，迅速倒入比色杯中，用儀器進(jìn)行測(cè)試。
　　標(biāo)本測(cè)試：在小試管內(nèi)先加入100μL酶，然后加入2.5毫升樣本提取液，100μL顯色劑，混勻靜置抑制10分鐘后，立即加入底物100μL。搖勻，馬上轉(zhuǎn)移到比色杯中，放入儀器，進(jìn)行測(cè)定。

二、測(cè)試結(jié)果判斷
　　　　抑制率＞50%時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，對(duì)于陽(yáng)性樣本要有2次以上重復(fù)檢測(cè)。當(dāng)抑制率達(dá)到50%以上，表明被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過(guò)安全標(biāo)準(zhǔn)，請(qǐng)用氣相色譜等仲裁方法確認(rèn)。

農(nóng)殘速測(cè)試劑對(duì)幾種常見(jiàn)農(nóng)藥的檢測(cè)限(mg/kg)

　　注：在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，檢測(cè)限可能會(huì)隨產(chǎn)品種類(lèi)和酶活性的變化而有所波動(dòng)，并可以根據(jù)客戶的具體需求做出調(diào)整。

四、注意事項(xiàng)

　　1、試劑開(kāi)封前應(yīng)4℃冷藏，保質(zhì)期1年。
　　2、酶試劑可直接使用。用后4℃冷藏，開(kāi)啟安瓶后請(qǐng)?jiān)?/span>1月內(nèi)使用完。
　　3、底物溶解后需0~5 ℃ 冷藏，用畢請(qǐng)蓋好膠塞并在1月內(nèi)使用完。
　　4、顯色劑溶解后可室溫保存，請(qǐng)?jiān)?/span>6個(gè)月內(nèi)使用完。
　　5、用于移取試劑或樣品的器具都要專用，避免交叉污染。
　　6、酶試劑是極易受到污染失活的試劑，因此，測(cè)試時(shí)，應(yīng)先吸取酶試劑。不論酶試劑是否使用，都不能倒回去。否則，容易污染整瓶試劑造成酶試劑失效，產(chǎn)生錯(cuò)誤的測(cè)試結(jié)果。