5-溴脫氧*核苷(5-Bromo-2-deoxyUridine,簡稱BrdU)可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),活體注射或細胞培養(yǎng)加入,而后利用抗Brdu單克隆抗體,ICC染色,顯示增殖細胞。同時結(jié)合其它細胞標記物,雙重染色,可判斷增殖細胞的種類,增殖速度,對研究細胞動力學有重要意義。
BrdU摻入法適用于體內(nèi)檢測目標細胞的增殖,一般將BrdU摻入小鼠的飲用水中或者經(jīng)腹腔注射,也可以兩種方法同時使用。經(jīng)過一段時間后,取出目標細胞制成單細胞懸液,用多聚甲醛固定細胞,然后用打孔劑皂苷(saponin)在細胞膜上打孔,zui后標記熒光素偶聯(lián)抗BrdU抗體,目標細胞中BrdU陽性的細胞就是增殖的細胞,陽性細胞比例越高,說明其增殖越活躍。
來看看不帶標記以及帶熒光直標的exbio BrdU抗體——通過BrdU法檢測細胞增殖。
Anti-BrdU PE丨PE標記的BrdU 抗體
實驗結(jié)果圖:
K562細胞摻入BrdU的流式細胞儀分析(細胞內(nèi)染色),使用抗Brdu PE染色分析結(jié)果。
Anti-BrdU Purified丨BrdU 抗體
實驗結(jié)果圖:
使用純化的抗BrdU(通過山羊抗小鼠IgG1 FITC檢測)在CEM人急性淋巴細胞白血病細胞系中摻入5-溴脫氧*(BrdU)的流式細胞術(shù)分析。 上圖顯示了細胞各個周期階段(S-,G1-,G2 / M-階段)。
用抗BrdU對BrdU標記的細胞(小雞胚組織;石蠟包埋切片)進行免疫組織化學染色結(jié)果圖。
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EXBIO BrdU 抗體丨流式抗體解決方案
EXBIO BrdU 抗體丨流式抗體解決方案