1 適用范圍:
本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計數(shù)。
2 方法原理:
將霉菌營養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙片上,通過培養(yǎng),在酶顯色劑的放大作用下,使霉菌和酵母菌在紙片上顯現(xiàn)出出來,通過計數(shù)報告結果。
3 方法特點:
與傳統(tǒng)方法相比,省去了配制培養(yǎng)基、消和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,即開即用,操作簡便。培養(yǎng)時間由一周縮短為48h~72h。
4 操作方法
4.1樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內,經(jīng)充分振搖做成1:10的稀釋液,用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌水的試管內,用1mL滅菌吸管反復吸吹50次做成1:100的稀釋液,以此類推,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
4.2接種:
4.2.1一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測。將檢驗紙片水平放臺面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到*的濾紙片上,然后輕輕將上蓋膜放下,靜置5min,每個稀釋度接種兩片。
4.2.2用手指先沿方格區(qū)邊緣刮一下,防止水外流,然后再在中間輕輕推刮,使水分在紙片方格區(qū)內均勻分布,并將氣泡趕走。
4. 3培養(yǎng):將加了樣的檢驗紙片每12片疊放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48h開始觀察計數(shù)。
4. 4結果判斷與計數(shù):霉菌和酵母菌在紙片上生長后會顯示藍色斑點,霉菌菌落顯示的斑點略大或有點擴散,酵母菌落則較小而圓滑,許多霉菌在培養(yǎng)后期全呈現(xiàn)其本身*的顏色。選擇菌落數(shù)適中(10~50個)的紙片進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。
5 計數(shù)原則及報告方式:
5.1通常選擇菌落在10~50個之間的紙片進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)報告之。
5.2具體計數(shù)原則可參照細菌(菌落)總數(shù)的測定方法進行。
6 附加說明:由于霉菌常以孢子的形式于空氣中到處傳播,而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得撿出,因此檢測霉菌時需特別小心操作,取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細消,接種時盡量避免空氣流動,動作要干凈利落,每次非常好用滅菌生理鹽水接一片空白對照,以免出現(xiàn)假陽性結果。