一、概要
三聚氰胺是一種低、無味的純白色單斜棱晶體,形似蛋,屬于三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物,廣泛應(yīng)用于塑料、染料、化肥的生產(chǎn)和紡織行業(yè)。由于三聚氰胺分子含氮量很高,只要添加到食品中就可在檢測中造成蛋白質(zhì)含量較高的假象。目前在飼料、牛奶、奶粉、餅干、奶糖等相關(guān)產(chǎn)品均發(fā)現(xiàn)有三聚氰胺殘留現(xiàn)象。動物實驗結(jié)果表明,三聚氰胺的攝入可能會導(dǎo)致繁殖障礙、膀胱炎、慢性腎炎、腎結(jié)石、甚至膀胱癌?,F(xiàn)有的檢測三聚氰胺方法如液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、質(zhì)譜電噴射離子技術(shù)其樣品前處理復(fù)雜、所需儀器昂貴、操作復(fù)雜、耗費時間。而使用三聚氰胺ELISA試劑盒能夠既快速又準(zhǔn)確的分析樣品中三聚氰胺殘留。
本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品,操作時間短于45min,能很大限度地減少操作誤差和工作強度。
二、試驗原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被三聚氰胺抗原,樣本殘留的三聚氰胺和微孔條上預(yù)包被的抗原競爭抗三聚氰胺抗體,加入TMB底物顯色,樣本吸光值與其殘留物三聚氰胺成負相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣本中三聚氰胺的含量。
三、適用范圍
可定性、定量檢測奶粉、牛奶、酸奶等乳制品及飼料樣本中三聚氰胺的殘留量。
四、交叉反應(yīng)率
三聚氰胺………………………………………………100%
五、檢測方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度
試劑盒靈敏度:3 ppb
樣本檢測限:
奶粉……………………………………………………30ppb
發(fā)酵乳/奶油……………………………………………9ppb
純牛奶、生鮮奶…………………………………………3ppb
回收率:
奶粉…………………………………………………100±10%
酸奶…………………………………………………80±10%
純牛奶、生鮮奶……………………………………100 ± 10%
精密度:
試劑盒的變異系數(shù)均小于10%
六、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20~25℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存試劑盒于2~8℃,不要冷凍,將不用的酶標(biāo)板放進自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質(zhì)的跡象
發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5<>)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8、在加入底物液后,一般顯色時間為10~15min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到20min(或更長),但不得超過20min。反之,則減短反應(yīng)時間。
9、該試劑盒*反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
七、貯藏條件及保存期
貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個月。