產(chǎn)品名稱:乳酸脫氫酶細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:500次
儲(chǔ)存條件:—20℃,12個(gè)月
用途:又稱培養(yǎng)細(xì)胞消化液,用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項(xiàng):無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA組成,含酚紅。自備材料:
1、 PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機(jī)
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項(xiàng):
1、 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。使用說明:
1. 貼壁細(xì)胞的消化:
a.吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA),略蓋過細(xì)胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)。加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅,不含EDTA)后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細(xì)胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強(qiáng),推薦選擇C0201胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細(xì)胞消化液都含有EDTA,消化能力相對(duì)更強(qiáng)一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的C0203 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
3. 對(duì)于酚紅可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析,推薦選擇不含酚紅的C0201 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)。
4. 對(duì)于EDTA可能會(huì)干擾后續(xù)的測(cè)試分析時(shí),推薦選擇不含EDTA的C0205 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,不含EDTA)和C0207 胰酶細(xì)胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含EDTA)。
5. 對(duì)于胰酶特別敏感的細(xì)胞,即對(duì)于消化時(shí)間特別快、消化時(shí)間比較難控制的情況,推薦選擇C0202胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶細(xì)胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
5-氯-1,3-二甲基吡唑 54454-10-3
54610-73-0
3-溴吡唑[1,5-A]嘧啶 55405-67-9
鄰氰甲基苯甲酸甲酯 5597-4-6
3-氰甲基苯甲酸 5689-33-8
氯化硒 5707-04-0
2-環(huán)己基乙醇 4442-79-9
2-氟苯甲酰胺 445-28-3
3-甲基-1,5-戊二醇 4457-71-0
2,4,6-三吡喃四氟化硼鹽 448-61-3
芐基乙基丙二酸 42998-51-6
3-氯-4-氟溴化鎂 413589-34-1
二硫化四異丙基秋蘭姆 4136-91-8