鄭州市牙科醫(yī)院污水處理設備生產(chǎn)型號配置
當下已經(jīng)到了必須利用超常規(guī)手段進行搶救式治理的階段。環(huán)湖截污工程官員告訴財新記者，隨著旅游人口的急劇增加，流域的污水處理系統(tǒng)已不堪重負，尤其在旅游業(yè)較為集中的雙廊地區(qū)，當?shù)匚鬯幚韽S因為處理能力有限，每天都需要用“灑水車”將污水外運。
主導產(chǎn)品：二氧化氯發(fā)生器|自來水廠消毒設備|醫(yī)院污水處理設備|小區(qū)污水一體化處理設備|游泳池水消毒設備|等專業(yè)水消毒殺菌設備。
鄭州市牙科醫(yī)院污水處理設備生產(chǎn)型號配置
實驗室AO反應器流程圖
1.2 DNA提取及PCR擴增
DNA提取采用PowerSoil® DNA Isolation Kit試劑盒，按照試劑盒流程提取DNA。以所提取各樣品DNA為模版，對其16S rDNA V4區(qū)擴增。反應體系為30 μL，上游引物為EUb341f：5′-cctacgggaggcagcag-3′，下游引物為Eub907r：5′-ccgtcaattcctttgagttt-3′。PCR擴增管中添加DNA模板0.5 μL，正反向引物各0.6 μL，滅菌水22.4 μL，dNTP 2.4 μL，3 μL緩沖液，ExTaq酶0.5 μL。PCR反應程序：先94 ℃預變性10 min，然后進行30個循環(huán)(94 ℃變性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min)，Z后72 ℃延伸10 min。
擴增結(jié)束后，運用1%瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進行檢測，使用Axyprep DNA凝膠回收試劑盒(AXYGEN)切膠回收DNA。PCR擴增后的條帶亮度明顯，位置清晰，可直接用于后續(xù)測序分析。委托北京理化分析測試中心進行Illumina MiSeq高通量測序。
高通量測序數(shù)據(jù)分析
本研究采用Illumina MiSeq PE2 × 125測序方法進行測序。測序數(shù)據(jù)下機后，根據(jù)Barcode拆分不同樣本數(shù)據(jù)，并去除Barcode序列及引物序列，利用FastQC對序列進行質(zhì)量控制。使用FLASH(v1.2.7，ccb.jhu.edu/software/FLASH/)根據(jù)overlap拼接Miseq雙端測序數(shù)據(jù)，拼接成功率控制在90%以上。利用QIIME(1.8，qiime.org/)過濾低質(zhì)量序列，利用UCLUST對獲得的高質(zhì)量序列進行操作分類單元(OTU)劃分，97%作為相似性閾值，并將獲得的OTU與SILVA非冗余度0.9的16S序列數(shù)據(jù)庫比對，獲得各OTU代表序列的分類信息。基于OTU的聚類結(jié)果，使用QIIME(1.8，qiime.org/)軟件計算各個樣本α多樣性，以反映本次測序深度、物種均勻性等，并根據(jù)注釋結(jié)果，計算樣本間距離矩陣，進行PCA可視化。利用ANOVA(analysis of variance)方法計算污水廠與反應器中門和綱水平上物種注釋的豐度差異情況。利用冗余分析(RDA)解析微生物與環(huán)境因子的相關(guān)性。實驗設計原始數(shù)據(jù)上傳NCBI網(wǎng)zhan，數(shù)據(jù)項目編號(BioSample accession)為SAMN08107549。
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