服務流程：
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因檢測試劑盒(熒光-PCR法) | 50T | YS-P014520 |
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
西尼地平英文名稱： Ketanserin Tartrate脊索生成素樣蛋白1抗體包裝5g
纈沙坦英文名稱： Ketoconazole神經(jīng)誘導胚胎發(fā)育相關蛋白Churchill抗體包裝25g
鹽酸阿米洛利英文名稱： Ketoconazole二氫嘧啶酶相關蛋白3抗體包裝5g
鹽酸艾司洛爾英文名稱： Kitasamycin轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體包裝1g
鹽酸酮英文名稱： Latanoprost神經(jīng)網(wǎng)蛋白CopineVI抗體包裝5g
鹽酸巴尼地平英文名稱： Lenalidomide腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1C抗體包裝1g
鹽酸貝那普利/苯那普利英文名稱： Lenalidomide補體因子B抗體包裝25g
鹽酸貝尼地平英文名稱： Letrozole乙酰膽堿受體前體蛋白AChRα1抗體包裝5g
鹽酸地爾硫卓英文名稱： Letrozole豬瘟病包膜糖蛋白E2抗體包裝100g
鹽酸丁咯地爾英文名稱： Leuprorelin Acetate （Leuprolide Acetate）冷休克結構域蛋白C2抗體包裝25g
鹽酸多巴酚丁英文名稱： Levetiracetam碳酸酐酶10抗體包裝500g
鹽酸桂利英文名稱： LevetiracetamL選擇素抗體包裝100g
鹽酸決奈達隆英文名稱： Lincomycin HCl致癌基因C-Myc抗體包裝25g
鹽酸喹那普利英文名稱： Lincomycin HCl膽囊收縮素8抗體包裝500g
鹽酸拉貝洛爾英文名稱： Liothyronine sodium上皮鈣粘附分子抗體包裝5MG
轉(zhuǎn)基因植物PAT基因檢測試劑盒(熒光-PCR法)F VIII Ag ELISA Kit 大鼠第八因子相關抗原反式-2-己烯 98%
M2-PK ELISA Kit 大鼠酮酸激酶M2型同工酶4-三氟水楊酸 98%
AChRab ELISA Kit 大鼠酰膽堿受體抗體2-硝-4-三氟酸 99%
GABA ELISA Kit 大鼠γ氨丁酸對二 98%
5-HT ELISA Kit 大鼠5羥色1,4-亞二酸 97%
SP-R ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)受體4-三氟硫代酰 98%
SP ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)3-(三氟) 98%
AFU ELISA Kit 大鼠αL巖藻糖苷酶間-三氟 98%
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
