操作步驟：
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
服務：
我們可以根據(jù)您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠雌三醇(E3)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat female three alcohol (E3) ELISA Kit |
貨號 | YS-R10940 |
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試劑配制
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
朝藿定B;羊霍定B 110623-73-9 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
菝葜皂苷元；知母皂苷元 126-19-2; 82597-74-8 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
蓮心堿高酸鹽 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支
柴胡 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格： 1g
f喹酸 對照品 訂購|咨詢 規(guī)格： 100mg;99.5％
粘菌素（酸） 標準品 訂購|咨詢 規(guī)格： 100mg
竹紅菌乙素;Hypocrellin B 123940-54-5 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
紫堇靈;(+)-coryline 18797-79-0 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
8-氧黃連堿 ; 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
油酸;cis-9-Octadecei 112-80-1 訂購|咨詢 規(guī)格： 0.1ml
氧化槐果堿 ;Oxysophocarpi 26904-64-3 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
野百合堿;Mocrotaline 315-22-0 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
薟精醇;Darutigel 5940-00-1 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
王不留行黃苷;Vaccarin 53452-16-7 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
拓撲康;Topotecan 123948-87-8 訂購|咨詢 規(guī)格： 20mg
大鼠雌三醇(E3)ELISA檢測試劑盒費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)
NCI-H2170(人肺鱗細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.小多孢菌 Micropolyspora sp.
酒假絲酵母 Candida kefyr異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
小鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
大鼠大隱靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基NCI-H1688(人典型小細胞肺細胞)
銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa米根霉 Rhizopus oryzae
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii臭曲霉 Aspergillus foetidus
LS 180(人結腸腺細胞)大鼠雪旺氏細胞*培養(yǎng)基
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
刺芹側耳 Pleurotus eryngii釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠成纖維細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
人腦動脈血管內皮細胞*培養(yǎng)基MDA-MB-435(人腺高轉移細胞)
熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens植物桿菌 Lactobacillus Plantarum
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis酸鏈球菌 Streptococcus lactis
HGC-27人胃細胞大鼠肝實質細胞*培養(yǎng)基
