試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Rat vitamin D (VD) ELISA Kit |
貨號 | YS-R12325 |
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷;Isorha 5041-82-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
原兒茶醛;Protocatechuald 139-85-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
L-纈氨酸;L-Valine 72-18-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷;Tenuifolin 20183-47-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
匙羹藤酸I;GyMneMic acid 122168-40-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
水合氧化前胡素;Oxypeucedani 2643-85-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
麝香草酚; Thymol 89-83-8 訂購|咨詢 規(guī)格: 100mg
山姜素;Alpinetin 36052-37-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
20(R)人參皂苷Rg3 ;20(R)G 38243-03-7 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
20-去氧巨大戟萜醇;20-deoxyi 54706-99-9 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 36948-76-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 5mg
β-蒎烯;beta-Pinene 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
馬兜鈴;Aristolone 25274-27-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
木犀草苷;Cynaroside 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
龍膽山酚;Bellidifolin 2798-25-6 訂購|咨詢 規(guī)格: 10mg
大鼠維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)英文名稱:PC-12(低分化)
肝胃消化干粉培養(yǎng)基1萬毫升/袋國產(chǎn)/進(jìn)口
甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂/Toluidine Blue-O-Dnase Agar100克國產(chǎn)/進(jìn)口
PALCAM添加劑/PALCAM Supplement添加到HB4188中,用于李氏菌的選擇性分離培養(yǎng)10毫升國產(chǎn)/進(jìn)口
人支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 規(guī)格: 250g 用途: 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-...
氨基酸脫羧酶試驗(yàn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 供鑒別腸道菌屬能否產(chǎn)生氨基酸脫羧酶用
半糖凝集素9C(GAL9C)重組蛋白英文名稱:Recombinant Galectin 9C (GAL9C)
環(huán)加氧酶1(PTGS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1 (PTGS1)
熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Heat Shock Transcription Factor 1 (HSF1)
胰島素(INS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin (INS)
HCT-8(人盲腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HELF(人胚肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。