試劑配制:
1、人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌 | Human ACE ELISA Kit | 48T/96T |
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)Elisa KitHuman ACE ELISA Kit
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌【實(shí)驗(yàn)用途】ACE,血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶,是一種鋅金屬肽酶,對(duì)水和鹽的代謝及維持血壓起重要作用。血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶(ACE)是一種單鏈多態(tài)酸性糖蛋白,活性中心含有金屬元素鋅,分子量約14~16kd,屬二肽羧肽酶。近來人們認(rèn)為,ACE主要存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞上,同時(shí)也可以存在于其他上皮細(xì)胞上。人體內(nèi)含ACE的組織為腦脈絡(luò)叢、黑質(zhì)紋狀體通路及基底節(jié)區(qū)。ACE在腎素血管緊張素系統(tǒng)和激肽釋放酶原-激肽系統(tǒng)中起著主要作用。ACE作用于血管緊張素Ⅰ(十肽)的C末端,脫去組氨酰亮氨酸,形成具有強(qiáng)增壓作用的血管緊張素Ⅱ(八肽);ACE還能作用于具有降壓作用的舒緩激肽(九肽)的末端,脫去苯丙氨酰精氨酸,使之失去生理活性,從而發(fā)揮調(diào)節(jié)血管張力、維持血壓穩(wěn)定的作用。另外在平滑肌細(xì)胞增生中也有一定作用。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
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操作步驟:
1)人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
注意事項(xiàng):
1加樣:
①人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
公司人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點(diǎn)擊了解更多人elisa kit。
?現(xiàn)貨供應(yīng) 圍脂滴蛋白4(PLIN4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 圍脂滴蛋白4(PLIN4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 圍脂滴蛋白5(PLIN5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 吡哆醛激酶(PDXK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 吡哆醛磷酸磷酸酶(PDXP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 吡啶酚(PYD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A(RNASE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A(RNASE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A10(RNASE10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A11(RNASE11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A12(RNASE12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶A13(RNASE13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 補(bǔ)體因子P(CFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核心蛋白聚糖(DCN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(PLTP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶Elisa Kit品牌硫酸慶大霉素4℃保存Gentamycin Sulfate現(xiàn)貨供應(yīng)
硫酸慶大霉素溶液,15mg/mL-20℃避光保存Gentamycin Sulfate Solution現(xiàn)貨供應(yīng)
硫酸鐵室溫干燥避光保存Ferric Sulphate 現(xiàn)貨供應(yīng)
硫酸新霉素室溫保存Neomycin Trisulfate Salt Hydrate現(xiàn)貨供應(yīng)
硫酸新霉素干粉4℃保存Neomycin Sulfate Powder現(xiàn)貨供應(yīng)
硫氧還蛋白-20℃保存Thioredoxin現(xiàn)貨供應(yīng)
魯米諾4℃保存Luminol 現(xiàn)貨供應(yīng)
鹿特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存現(xiàn)貨供應(yīng)
卵白蛋白4℃保存Ovalbumin現(xiàn)貨供應(yīng)
卵白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品,2mg/mL-20℃保存Ovalbumin Standard現(xiàn)貨供應(yīng)
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子-20℃保存Growth Factor For Cell Culture現(xiàn)貨供應(yīng)