產(chǎn)品名稱:6-熒光素亞磷酰胺單體
規(guī)格:100mg/1g
貨號(hào):BJP1267
分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
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檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
氯化天竺葵素29956-99-8價(jià)格Bak (D2D3) Rabbit mAb20 ul
3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黃酮實(shí)驗(yàn)方法Bak (D2D3) Rabbit mAb100 ul
甲酰芍藥苷38642-49-8實(shí)驗(yàn)步驟IRF-6 Antibody100 ul
二氫楊梅素27200-12-0實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-Threonine Antibody (P-Thr-Polyclonal) (HRP Conjugate)100 ul
馬錢苷18524-94-2價(jià)格Phospho-Akt Substrate (RXXS*/T*) (110B7E) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul
芒柄花苷486-62-4 實(shí)驗(yàn)步驟Pan-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D54) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul
脫氧膽酸83-44-3 價(jià)格Acetylated-Lysine (Ac-K-100) MultiMab™ Rabbit mAb mix (HRP Conjugate)100 ul
人參皂苷Rg1 22427-39-0 ?*GIT2 Antibody100 ul
肉桂酸140-10-3*NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb20 ul
水飛薊賓22888-70-6 實(shí)驗(yàn)方法NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb100 ul
新芒果苷64809-67-2實(shí)驗(yàn)步驟Nucleolin (D4C7O) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul
異鉤藤堿6859-01-4 實(shí)驗(yàn)方法Phospho-Histone H2B (Ser14) (D67H2) Rabbit mAb100 ul
異銀杏素548-19-6實(shí)驗(yàn)步驟Toll-like Receptor 3 (D10F10) Rabbit mAb100 ul
噻嗪二酮212701-97-8價(jià)格Mis18-α (D3N2X) Rabbit mAb500 ul
七葉皂苷A123748-68-5?價(jià)格CD11c (3.9) Mouse mAb (FITC Conjugate)100 ul
(R型)原人參二醇 *Phospho-ALK (Tyr1096) (D96H9) Rabbit mAb100 ul
三七皂苷R2(R型)實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-EGF Receptor (Tyr845) (D63B4) Rabbit mAb100 ul
6-熒光素亞磷酰胺單體Coprinus│comatus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃
Pseudoalteromonas│elyakovii分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Lactobacillus│casei凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0006生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Mycobacterium│tuberculosis凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Rhizobium│sp.分離基物: 卷莢相思斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 63生長條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Alternaria│sp.分離基物: 種子斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法
Aspergillus│niger分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Corynebacterium│glutamicum凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 污水處理培養(yǎng)基: CM0841生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
玫瑰新鞘氨醇菌種屬: Novosphingobium│rosa凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 468生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法