客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱：Cy5 亞磷酰胺單體
規(guī)格：100mg/1g
貨號：BJP1273
分類：熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標準曲線
·溶解曲線 ·擴增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
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檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應(yīng)體系配制如下表：
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設(shè)置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
磁珠動物 DNAout50 次說明書c-IAP1 (D5G9) Rabbit mAb20 ul
痰液 DNAout50 次說明書c-IAP1 (D5G9) Rabbit mAb100 ul
豬Ⅲ型前膠原肽（PⅢNP）分析檢測試劑盒PKM1 (D30G6) XP®Rabbit mAb20 ul
小鼠維生素D（VD）分析檢測試劑盒PKM1 (D30G6) XP®Rabbit mAb1 Kit
小鼠雙氫睪酮（DHT）分析檢測試劑盒PathScan® Total Insulin Receptor β Sandwich Kit50 assays
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）分析檢測試劑盒Phototope-HRP Western Blot Detection System100 ul
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶（MMP-8）分析檢測試劑盒ASS1 (D4O4B) XP® Rabbit mAb50 assays
小鼠膀胱腫瘤抗原（BTA）分析檢測試劑盒Phototope-HRP Western Blot Detection System1 Kit
小鼠白介素7（IL-7）分析檢測試劑盒PathScan® Phospho-IKKα (Ser176/180) Sandwich Kit100 ul
小鼠Ⅰ型膠原C端肽（CTX-Ⅰ）分析檢測試劑盒Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody1 ml
豚鼠前列腺素E2（PGE2）分析檢測試劑盒Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody5 ml
人甲狀腺非肽激素抗體（THAA）分析檢測試劑盒Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody1 Kit
人促甲狀腺素（TSH）分析檢測試劑盒Autophagy Vesicle Nucleation Antibody Sampler Kit1 ml
人β羥丁酸（β-OHB）分析檢測試劑盒Anti-biotin, HRP-linked Antibody100 ul
人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E（CLEC4E）分析檢測試劑盒Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 1 ml
犬多肽YY（PYY）分析檢測試劑盒Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 5 ml
犬膽囊收縮素/縮膽囊素八肽（CCK-8）分析檢測試劑盒Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 1 ml
Cy5 亞磷酰胺單體Streptococcus│suis分離基物: 仔豬腹瀉排泄物凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Chaetomium│cochlioides Palliser斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26存儲條件: 定期移植法
Trichoderma│sp.分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物；凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有抑制金黃色葡萄球菌Staphyloccocus aureus 作用培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法
帶小棒鏈霉菌種屬: Streptomycesclavuligerus分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株；基因組序列號:ABJH00000000,CM000913,CM001015；細胞提取物能夠通過環(huán)化作用將乙酰-L-半胱氨酰-D-纈氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)槠S青霉素培養(yǎng)基: 158生長條件: 28℃
Lactobacillus│plantarum凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0006生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
釀酒酵母種屬: SaccharomycescerevisiaeHansen安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 啤酒酵母培養(yǎng)基: 13生長條件: 25-28℃
Streptomyces│clavuligerus凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生頭霉素C培養(yǎng)基: CM0012生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
膠凍樣芽胞桿菌種屬: Bacillus│mucilaginosus凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0067生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
Micromonospora│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制PheRS酶活培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
操作程序：
由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細胞），本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
