試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。
產(chǎn)品名稱 | 人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA檢測試劑盒 |
英文名稱 | Human leukocyte antigen E (HLA-E) ELISA Kit |
貨號 | YS-H11707 |
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
造血細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:HCST
四磷酸鳥苷水解酶抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:HDDC3
HHLA3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:HHLA3
白細(xì)胞介素6受體α/IL-6Rα抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:IL-6R alpha
跨膜蛋白BRI抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:ITM2B
內(nèi)臟器官發(fā)育轉(zhuǎn)位相關(guān)蛋白NPH2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:Inversin
胰島素受體底物-4抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:IRS-4
胰島素生長因子樣家族成員1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:IGFL1
胰島素降解酶抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:IDE
蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Jak3
磷酸化細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白Kir5.1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:phospho-KIR5.1(Ser416)
磷酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Phospho-KSR1 (Ser392)
劍蛋白p80抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:katanin p80
淋巴細(xì)胞趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Lymphotactin
人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA檢測試劑盒小鼠過氧化物酶體生物合成因子2(PEX2)ELISA試劑盒 英文名: PEX2 ELISA Kit
小鼠過氧化還原酶6(PRDX6)ELISA試劑盒 英文名: PRDX6 ELISA Kit
小鼠過氧化還原酶4(PRDX4)ELISA試劑盒 英文名: PRDX4 ELISA Kit
小鼠歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒 英文名: HCAM ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶9(P9)ELISA試劑盒 英文名: P9 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶8(P8)ELISA試劑盒 英文名: P8 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶7(P7)ELISA試劑盒 英文名: P7 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶3(P3)ELISA試劑盒 英文名: P3 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶14(P14)ELISA試劑盒 英文名: P14 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶11(P11)ELISA試劑盒 英文名: P11 ELISA Kit
小鼠胱天蛋白酶1(P1)ELISA試劑盒 英文名: P1 ELISA Kit
小鼠胱硫醚β合酶(CβS)ELISA試劑盒 英文名: CβS ELISA Kit
小鼠骨形成蛋白8B(BMP8B)ELISA試劑盒 英文名: BMP8B ELISA Kit
操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。