NCI-H295R人腎上腺皮質細腺癌細胞公司正在出售的產品：Lenti-X293T人腎上皮細胞系 Lenti-X293T：LentiX293T SNU-16人胃癌細胞 SNU16:SNU-16 人淋巴母細胞；T2(174×CEM.T2) (STR) T2174×CEM.T2：T2174×CEMT2 C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纖維細胞 C3H10T12
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產品名稱 | 貨號 | A01X886 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | NCIH295R:NCI-H295R |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | NCI H295R |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 48歲 |
組織來源 | 器官：腎上腺 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | NCI-H295R細胞是源于多能腎上腺皮質癌細胞系NCI-H295細胞，后者由Gazdar·A·F等建立，從腎上腺皮質的腫瘤中分離而來。NCI-H295細胞經改變獲得了NCI-295R細胞，群體倍增時間從原來的5天減為2天。NCI-295細胞懸浮生長，而NCI-H295R細胞呈單層貼壁生長。NCI-H295R細胞保留了產生雄激素的能力，對血管緊張素Ⅱ和鉀離子有反應。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM/F12＋ITS-G（PB180429）＋10% FBS＋1% P/S(PB180120） |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
基因表達情況 | aldosterone; cortisol; C19 steroids |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
CD8抗體 磷酸化白細胞介素3受體β抗體 英文名；phospho-IL3RB (Tyr593)
c-fos抗體 磷酸化雌激素受體α抗體 英文名；Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)
COREST蛋白抗體 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體 英文名；Phospho-PKA alpha + beta (Thr198)
CTP合成酶2抗體 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 英文名；Phospho-NEDD4-2 (Ser342)
CYP27B1單克隆抗體 磷酸化核仁蛋白C23抗體 英文名；phospho-Nucleolin (Thr76)
DCST1蛋白抗體 磷酸化活化復制因子2重組兔單克隆抗體 英文名；phospho-ATF2 (Thr71)
DHX33蛋白抗體 磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 英文名；Phospho-Gab1 (Tyr627)
NCI-H295R人腎上腺皮質細腺癌細胞DMRTC1蛋白抗體 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 英文名；phospho-PIK3R1 (Tyr368)
AN1型鋅指蛋白5抗體 卷曲螺旋結構域蛋白7抗體 英文名；CCDC7
APC-Cy7標記人CD64單克隆抗體 抗Ⅵ型膠原抗體 英文名；Collagen VI alpha 1
APC標記人CD14單克隆抗體 可溶性附著蛋白α-SNAP抗體 英文名；Alpha SNAP
APC標記人CD43單克隆抗體 跨膜γ羧基酸蛋白1抗體 英文名；PRRG1
APC標記小鼠CD122單克隆抗體 跨膜蛋白29抗體 英文名；FAM156A
APC標記小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體 跨膜蛋白SEMA4A抗體 英文名；SEMA4A
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
