產(chǎn)品名稱 | NCI-H720 H720人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6545 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | NCI-H720 [H720] |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒
Rat basic fibroblast growth factor 4 (bFGF-4) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒
HumanCytotoxin-associatedprotein,CagAELISAKit 人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA試劑盒人6同?刈?
小鼠組織蛋白酶A(CTSA)ELISA試劑盒 ，英文名： CTSA ELISA Kit
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA檢測試劑盒Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 96T/48T
犬胰島素(INS)免疫試劑盒 Dog Insulin,INS ELISA Kit
英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2a小鼠8-異前列腺素F2α規(guī)格：96T/48T
部分蛋白酶切多肽譜分析試劑盒10次
RatFollistatin,F?刈?
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒 ，英文名： β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA檢測試劑盒Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit 96T/48T
人Na+/H+交換體3(NHE3)免疫試劑盒 Human NHE3 ELISA Kit
英文名稱MouseMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(M?刈?
NCI-H720 H720人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞植物茉莉酸(JA)ELISA試劑盒
Human ai fibrillarin aibodies (AFA/snoRNP/U3RNP) ELISA Kit 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA試劑盒
Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforAFA/snoRNP/U3RNP(Humanai-fibrillarinaibody)E?刈?
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
