我司供應的elisa進口試劑盒免費代測,全程ELISA試劑盒實驗技術指導,免費代做實驗,索取產(chǎn)品說明書。
規(guī)格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產(chǎn)品名稱 | 人類白細胞抗原C(HLA-C)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Human leukocyte antigen C (HLA-C) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G10568 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
PBK Others Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 芍藥苷(標準品)質量規(guī)格:>98%,分析標準品Paeoniflorin
人少突膠質前體細胞cDNAHOPC cDNA芍藥苷(40%)質量規(guī)格:≥40%Paeoniflorin
MCF-7細胞,人癌細胞 人肺鱗癌細胞,LTEP-s細胞 滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)芍藥苷(50%)質量規(guī)格:≥50%,BRPaeoniflorin
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild芍藥苷(90%)質量規(guī)格:≥90%Paeoniflorin
PLAT Others Human 人 tPAβ 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-(4-甲氧羰基苯基)-10,15,2-三苯基卟吩(>90.0%(HPLC))質量規(guī)格:>90.0%(HPLC)5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F33,3',4,4'-聯(lián)本四,英文名或英文縮寫:DAB,級別:BR,85%,規(guī)格:100克
SGC-7901細胞,胃腺癌細胞 人食管癌細胞,Eca-109細胞 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12](R)-(+)-叔丁基亞磺酰安 (R)-(+)-2-Mqthyl-2-propcnqsulfincmidq 19699-78-9
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5L-西代胱安基醋 L-SqLqNOCYSTINq 961-88-3
VCAM1 Others Mouse 小鼠 VCAM1 / CD106 人細胞裂解液 (陽性對照) 失水蘋果1,英文名或英文縮寫:MA,級別:CP,規(guī)格:25克
人腎皮質近曲小管上皮細胞;HK-2150-25-4N,N-二甘酸 (BICINE)Bicine
人羊膜細胞;WISHHEPPS(EPPS)HEPPS (EPPS)超級25G16052-06-5RT
犬胸腺細胞;cf2Th SRSV轉化的3T3細胞,SRSV/3T3細胞 CCC-Ca761-03細胞,小鼠癌細胞2-安基庚烷;2-庚安;1-基己安 2-cMinohqptcnq;2-HqptylcMinq;1-MqthylhqxylcMinq;Hqptin;Hqptqdrinq;TucMinq;TucMinohqptcnq;2-HqptcncMinq; 13-8-0
人胚肺二倍體細胞;KMB-17GENEPAGE8%EZSQUEEZE*CLDPAK* 8% GENE PAGE, 擠壓式瓶裝生物技術級10X75MLCOLD
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wyoming/03/2003) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) -2-羧酸,英文名或英文縮寫:TCH,級別:AR,99.5%,規(guī)格:250克
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞鹽酸N-(1-Naphthyl)etxylenediamine dixy7nochloride
人類白細胞抗原C(HLA-C)elisa進口試劑盒DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱Retigabine質量規(guī)格:HPLC>95%,
腎小管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)利巴韋林Ribavirin質量規(guī)格:>99%,BR
IFNA8 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 利巴韋林(標準品)Ribavirin質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3硫酸核糖霉素Ribostamycin Sulfate質量規(guī)格:≥630µg/mg,BR,可用于細胞培養(yǎng)
GLC-82-TK細胞,人肺腺癌細胞(轉染TK基因的GLC-82細胞) 非洲綠猴腎細胞,COS-1細胞 CL-0066COLO 205(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2利福布丁Rifabutin 質量規(guī)格:>97%,BR
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。