培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
商品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | BJ-X97165 |
商品介紹:
名稱 小鼠肝星狀細胞 2.組織來源:肝臟組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠肝星形細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官,并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞(HSC)又名肝貯脂細胞、A貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等,是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞,各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為最終靶細胞。正常情況下,HSC處于靜止狀態(tài),當肝臟發(fā)生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時,HSC的表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚?,激活?/span>HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建,此過程也是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內,是合成、分泌細胞外基質的主要來源,在肝纖維化的發(fā)生中處于最重要地位。肝星形細胞是肝臟*的間充質細胞,約占肝臟細胞總數(shù)的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構,還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調節(jié)。此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。 5.方法簡介: ()實驗室分離的小鼠肝星形細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: ()實驗室分離的小鼠肝星狀細胞經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M041 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25% 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
人硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒*直銷
人甲狀腺結合球蛋白(TBG)免疫試劑盒*直銷
人催乳素釋放激素(PRH)免疫試劑盒*直銷
人E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒*直銷
雞基質金屬蛋白2(MMP-2)免疫試劑盒*直銷
大鼠(Cyt-C)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠過氧化物體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒進口、分裝
3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基 英文名稱:3% NaCl MR-VP Mows\system32\EhStorShell.dll
小鼠肝星狀細胞Salmonella anatum鴨沙門氏探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DDIT4L DNA損傷誘導轉錄樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba pogostemonis廣藿香探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周FGFR1OP/FOP 成纖維細胞生因子受體1原基因伴侶蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
羽扇豆源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD45/B220 白細胞共同抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml
Shewanella putrefaciens希瓦LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Ribonuclease Inhibitor 核糖核酸抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Trichodorus cobb毛刺線蟲PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Donkey Anti-rabbit IgG/FITC FITC標記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.3ml
Radix clematidis威靈仙PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周BMP3 骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Helicobacter spp.螺桿通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周POMC 阿黑皮素原抗體 規(guī)格: 0.1ml
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-F)人免疫缺陷病毒1型M群F型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HRG-alpha/Neuregulin 1 Heregulin α蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Radix saposhnikoviae防風探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DAT/Dopamine transporter 多巴胺轉運蛋白DAT抗體 規(guī)格: 0.1ml
Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )東部馬腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周HDL/high density lipoprotein 高密度脂蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml