公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | CEA/CD66人癌胚抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human carcinoembryonic antign, CEA Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63403 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Tremella│sanguinea Y. B. Peng 血耳Tremella│sanguinea Y. B. Peng分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Cladosporium│sp. 枝孢霉Cladosporium│sp.分離基物:桑葉片斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Aodiella albocinnamomea Y.C. Dai & Niemelä 白黃薄孔菌(斜面)Aodiella albocinnamomea Y.C. Dai & Niemelä分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧,5-7天存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥99% metals basis
Streptomyces│chartreusis Leach et al 教酒鏈霉菌Streptomyces│chartreusis Leach et al分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)生教酒菌素(chartreusin),抑制革蘭氏陽性細(xì)菌、分枝桿菌。對(duì)大腸桿菌、蠟樣芽孢桿菌的噬菌體也有作用。12生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥99%
Cyathus srcoreus (Schwein.) De Toni 糞生黑蛋巢菌(斜面)Cyathus srcoreus (Schwein.) De Toni分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25,好氧存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥98%
Flavodon│flavus (Klotzsch) Ryvarden 黃孢原毛平革菌Flavodon│flavus (Klotzsch) Ryvarden分離基物:皮部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥98%(HPLC)
Ceriporia│lacerata N. Maek. Suhara & R. Kondo 撕裂蠟孔菌Ceriporia│lacerata N. Maek. Suhara & R. Kondo分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物模式菌株:no木腐菌,用于該菌種群遺傳學(xué)研究。14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Bacillus│aryabhattai Shivaji et al. 芽孢桿菌Bacillus│aryabhattai Shivaji et al.分離基物:山茶葉片斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no141生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
CEA/CD66人癌胚抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CCL12/MCP5 單核趨化蛋白5抗體卡前列甲酯1-溴芘Human C-P (C-Peptide) ELISA Kit
CCL13/MCP-4 單核趨化蛋白4抗體卡鉑1-溴芘Human OxLDL (Oxidized Low Density Lipoprotein) ELISA Kit
CCL14/HCC-1 嗜粒趨化蛋白14抗體氮平1-溴芘Human ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit
CCL15/MIP5 巨噬炎性蛋白15林旦TadalafilHuman LN (Laminin) ELISA Kit
CCL16/HCC-4 巨噬炎性蛋白16抗體聯(lián)苯芐唑4-羥基環(huán)己烷甲乙酯Human COL1 (Collagen Type I) ELISA Kit
CCL17/TARC 胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體聯(lián)苯芐4-羥基環(huán)己烷甲乙酯Human MMP-25 (Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit
CCL21/6Ckine 淋巴趨化因子CCL21抗體萘普生鈉Sildenafil CitrateHuman MMP-10 (Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit
CCL20/MIP3 alpha 巨噬炎性蛋白20抗體撲米1-(3-氧基)-4-苯Human MMP-12 (Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit