ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | PAF大鼠血小板活化因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat platelet activating factor, PAF Elisa Kit |
貨號 | FS-R64607 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
范可尼綜合征相關蛋白FAN1抗體英文全稱Lysyl Oxidase2英文簡稱LOX2檢測范圍3716nmol/L-200U/L
范可尼貧血組蛋白A抗體英文全稱Lysyl Oxidase3英文簡稱LOX3檢測范圍3717nmol/L-160U/L
磷酸化FANCD2抗體英文全稱Lipoxidase3英文簡稱LOX3檢測范圍3718nmol/L-160U/L
范可尼貧血相關蛋白E抗體英文全稱Cytomegaoviyns英文簡稱CMV檢測范圍3719nmol/L-
范可尼貧血相關蛋白M抗體英文全稱purine nucleoside phosphorylase英文簡稱PNP檢測范圍3720nmol/L-120U/L
軟骨細胞Ezrin樣蛋白抗體英文全稱phytochelatin synt hase英文簡稱PSH檢測范圍3721nmol/L-10ng/mL
慢性粒細胞白血病33抗體英文全稱beta-fructofuranosidase英文簡稱β-FFase檢測范圍3722nmol/L-80U/L
磷酸化細絲蛋白A抗體英文全稱αprotease英文簡稱α-Pro檢測范圍3723nmol/L-4000pg/mL
FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體英文全稱βprotease英文簡稱β-Pro檢測范圍3724nmol/L-2000pg/mL
F-box富含亮氨酸重復蛋白4抗體英文全稱squalene synthase英文簡稱SQS檢測范圍3725nmol/L-120U/L
免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體英文全稱Geranylgeranyl pyrophosphate synthase英文簡稱GGPPS檢測范圍3726nmol/L-64U/L
Fcγ免疫球蛋白IgG結合蛋白抗體英文全稱farnesyl diphosphate synthase英文簡稱FFP檢測范圍3727nmol/L-80U/L
磷酸肌結合蛋白1抗體英文全稱ubiquitin-protein ligase英文簡稱UBPL檢測范圍3728nmol/L-10ng/mL
磷酸化成纖維細胞生長因子受體3抗體英文全稱Manganese peroxidase英文簡稱MnP檢測范圍3729nmol/L-64U/L
叉頭相關結構域包含蛋白1抗體英文全稱β-cyanoalanine synthase英文簡稱β-檢測范圍3730nmol/L-200U/L
串珠狀纖維結構蛋白1抗體英文全稱Oxalate decarboxylase英文簡稱OXDC檢測范圍3731nmol/L-80U/L
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒TRAF4 (D1N3A) Rabbit mAb100 ul
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒Syntaxin 1A (D4E2W) Rabbit mAb100 ul
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb20 ul
小鼠凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb100 ul
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒Vinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)100µl
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒ALDH2 Antibody100 ul
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 Smac/Diablo (D5S3R) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 MAVS (D5A9E) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
PAF大鼠血小板活化因子ELISA試劑盒實驗原理同源盒基因HOXA3蛋白抗體Hemapolin別名: 分子式: C20H32OS性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
同源盒基因HOXA4蛋白抗體Estra-4,9-diene-3,17-dione別名: 分子式: C18H22O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
同源盒基因HOXA6蛋白抗體Formestane別名: 分子式: C19H26O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
同源盒基因HOXA7蛋白抗體4-Chlorostosrone aceta別名: 分子式: C21H29ClO3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
羥基類固(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體Methoxydienone別名: 分子式: C20H28O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體17β-Hydroxy-17-methylandrosta-4,9(11)-dien-3-one別名: 分子式: C20H28O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
血紅素結合蛋白1抗體Hydrocortisone別名: 分子式: C21H30O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
血紅蛋白α抗體Labetalol hydrochloride別名: 分子式: C19H25ClN2O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準