商品介紹：
產(chǎn)品名稱 | 3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞細(xì)胞 | 貨號(hào) | AXB7319 |
規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | 3T3-L1 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對(duì)特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會(huì)好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí)，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲(chǔ)存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲(chǔ)少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 試劑盒
Human somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒
GuineapigleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANG-2(RabbitAngiopoietin2)ELISA人細(xì)胞系
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF9 ELISA Kit
雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA檢測試劑盒ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 96T/48T
人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒 Human Procollagen Ⅲ C-terminal Peptide,PⅢCP ELISA Kit
英文名稱MouseStemcellfactor，SCFELISAkit小鼠SCF規(guī)格：96T/48T
冰凍切片組人細(xì)胞系
人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA 試劑盒
豬血管舒緩(BK)免疫試劑盒 Pig Bradykinin,BK ELISA Kit
MouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAkit 小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanlipidperoxlde,LPOELISA試劑盒人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T人細(xì)胞系
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞細(xì)胞兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒
Human costimulatory molecular receptor (CMR) ELISA Kit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA試劑盒
HumanHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit 人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanE3/ubiquitin-proteinligase,E3/UBPLELISA試劑盒人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒規(guī)格：人細(xì)胞系
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時(shí)，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
