產(chǎn)品名稱 | NCI-H1618 人小細胞肺癌細胞 | 貨號 | AXB6485 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | NCI-H1618 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
Ai-GPR109A/HM74A/FITC 熒光素標記G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-KEAP1/FITC 熒光素標記胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40(C端)抗體 規(guī)格 0.1ml
CD133 造血干細胞抗原(多肽抗原) 0.5mg
phospho-HSP70 (Tyr41) 英文名稱： 0酸化熱休克蛋白-70抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-KEAP1/FITC 熒光素標記胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-E2F1/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥因子1α抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh C5ORF4 5號染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格 0.2ml
Peapeptide-3/Leuphasyl 五勝肽 1g
Phospho-HSP27(Ser78) 英文名稱： 0酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh SCN1A SCN1A抗體 規(guī)格 0.1ml
Ai-MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥因子1α抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-phosphoM-CSF Receptor(Tyr708) /FITC 熒光素標記0酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-Nrn1/Cpg15/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh BNIP3L 促凋亡BNIP3L蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白(鳥苷酸結(jié)合蛋白)(抗原) 0.5mg
Phospho-HSP27 (Ser82) 英文名稱： 0酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh REG4/RELP 再生基因蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-Nrn1/Cpg15/FITC 熒光素標記轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-Desmin/FITC 熒光素標記結(jié)蛋白抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus aibody Rh Cadherin 9 鈣粘附蛋白9抗體 規(guī)格 0.2ml
Collagen I(Ai-Collagen Type I) I型膠原蛋白 0.5mg
Phospho-HSP27 (Ser254) 英文名稱： 0酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh SEPT12 細胞分化蛋白SEPT12抗體 規(guī)格 0.2ml
Ai-p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化原活化蛋白激酶1/2抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-E-cadherin/FITC 熒光素標記E-鈣粘附分子抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Ai-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標記0酸化原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
NCI-H1618 人小細胞肺癌細胞Rhesus aibody Rh C3orf59/MB21D2 3號染色體開放閱讀框59抗體 規(guī)格 0.2ml
CD2AP (CD2-associated protein) 白細胞分化抗原CD2AP 0.5mg
Phospho-HSP27 (Ser15) 英文名稱： 0酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh SCC112/PIG54 細胞增殖誘導蛋白54抗體 規(guī)格 0.1ml
Ai-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標記0酸化原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
