服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
pCaMV35S基因核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10718 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
銹蘑培養(yǎng)基: 14模式菌株: no菌蓋或菌柄提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 26 定期移植法
-1476℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
檸檬球菌(加詞待譯)培養(yǎng)基: 471大洋細菌沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 20℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
串珠鐮孢 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法生長條件: 25-28℃提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 33大豆β-伴球蛋白α-亞基基因啟動子結構和功能的研究提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結法
彩色豆馬勃培養(yǎng)基: 14模式菌株: no組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 25-30 定期移植法
微桿菌1.海洋石油污染生物修復; 2.生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
弓形蟲(GJS株)主要用于科研、教學診斷液等模式菌株: no豬淋巴結提供形式: 其他安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
-1477℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
結核分枝桿菌生長條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
檸檬色赤桿菌大西洋細菌模式菌株: no水樣/深層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃
AS1.6973=DSM19592=KCTC12518培養(yǎng)基: 102模式菌株: no種屬: Joostellamarina韓國東海深度達100米的沿海海水安全等級: 1生長條件: 28℃
地中海中慢生根瘤菌培養(yǎng)基: 2模式菌株: no苦馬豆提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1生長條件: 30 定期移植法
ATCC7469=CCRC10940=CGMCC1.2134=DSM20021=IFO3模式菌株. Produces folate transport protein. Ass模式菌株: yes種屬: Lactobacillus│rhamnosus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0006生長條件: 37℃
海洋紅嗜熱鹽菌培養(yǎng)基: 471微生物/高溫菌(70℃)沉積物/深海沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no生長條件: 70℃ 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
-1478℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
雙去氧基姜黃素rh-VEGF(GST Tag)(Recombinant Vascuoar endothelial growth factor) 重組人血管內(nèi)皮生長因子ZNF268 鋅指脂蛋白-1b抗體
莪術姜黃TrK A.B.C 神經(jīng)生長因子的一種(抗原)ZNF231/Bassoon 鋅指蛋白231抗體
金絲桃苷active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺蛋白酶蛋白-3抗原ZNF230/RNF141 鋅指蛋白230抗體
金絲桃素r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents) 重組谷胱甘肽轉移酶GST標簽蛋白ZNF23 鋅指蛋白23抗體
絞股藍皂苷P4(Caspase-4) 半胱胺蛋白酶蛋白-4抗原ZNF217 鋅指脂蛋白217抗體
苦杏仁苷Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)ZNF185 鋅指蛋白185抗體
標準品GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 重組生長分化因子8/肌肉抑制素ZNF146 鋅指蛋白146抗體
苦參堿Trk B 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1 甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體
氧化苦參堿苦參素Insulin protein (Active) 重組人胰島素因子Zfp91 白血病相關新基因抗體
咖啡Trk C 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)ZFAND5 AN1型鋅指蛋白5抗體
pCaMV35S基因核酸檢測試劑盒Atazanavir 阿扎那韋(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
AtomoxetineHCl 鹽托莫西汀 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
AtomoxetineHCl 鹽托莫西汀(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
Atovaquone 阿托伐醌,阿托喹 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
Atovaquone 阿托伐醌,阿托喹(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)
Axitinib 阿西替尼 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W)
Azaperone 阿扎哌隆 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W)
AzasetronHCl 鹽阿扎司瓊 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BC
Azelastinebase 氮卓斯汀 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BC
BacitracinZinc 桿菌肽鋅 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BR
BenazeprilHydrochloride 鹽貝那普利/那普利 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%,BR
BenazeprilHydrochloride 鹽貝那普利/那普利(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>950µg/mg,BR
Bezafibrate 扎貝特 質(zhì)量規(guī)格:>950μg/mg,BR
Bezafibrate 扎貝特(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>96%
Blonanserin 布南色林 質(zhì)量規(guī)格:>96%
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。