ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | IL-7大鼠白介素7ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Interleukin-7, IL-7 Elisa Kit |
貨號 | FS-R64399 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體英文全稱soluble CD163英文簡稱sCD163檢測范圍388nmol/L-800pg/mL
Rho鳥苷酸交換因子2抗體英文全稱soluble CD38英文簡稱sCD38檢測范圍389nmol/L-800pg/mL
磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體英文全稱soluble major histocompatibility complex class I chain-related gene B英文簡稱sMICB檢測范圍390nmol/L-160pg/mL
去整合素樣金屬蛋白酶9抗體英文全稱solution OX40 Ligand英文簡稱sOX40L檢測范圍391nmol/L-20ng/mL
Rho GTP酶激活蛋白20抗體英文全稱sCD146英文簡稱sCD146檢測范圍392nmol/L-480ng/mL
含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體英文全稱soluble Toll-like receptor 6英文簡稱sTLR6檢測范圍393nmol/L-160ng/mL
乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體英文全稱soluble interleukin 2 receptor英文簡稱sIL-2R檢測范圍394nmol/L-480U/mL
軸抑制蛋白2抗體英文全稱Soluble Interleukin-7 Receptor英文簡稱sIL-7R檢測范圍395nmol/L-400pg/mL
AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體英文全稱soluble cluster of differentiation 14英文簡稱sCD14檢測范圍396nmol/L-8μg/mL
致瘤磷蛋白32相關(guān)蛋白1抗體英文全稱soluble Interleukin 6英文簡稱sIL-6檢測范圍397nmol/L-48pg/mL
光激酶A相互作用蛋白1抗體英文全稱sHLA-G英文簡稱sHLA-G檢測范圍398nmol/L-32ng/mL
艾滋病病制約錨定蛋白抗體英文全稱sHLA-I英文簡稱sHLA-I檢測范圍399nmol/L-1600ng/mL
核糖核酸酶L抑制蛋白抗體英文全稱soluble Complement receptor type1英文簡稱sCR1檢測范圍400nmol/L-80ng/mL
Rho GTP酶激活蛋白24抗體英文全稱soluble protein 185英文簡稱sp185;HER-2檢測范圍401nmol/L-200ng/mL
GTP酶激活蛋白ASAP3抗體英文全稱soluble Liver X Receptor英文簡稱LXR檢測范圍402nmol/L-8ng/mL
激活素受體1C抗體英文全稱sCTLA-4英文簡稱sCTLA-4檢測范圍403nmol/L-8ng/mL
副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒)Image-iT® FX Signal Enhancer100 ul
白色念珠菌(CAN)核酸檢測試劑盒)CAD Antibody100 ul
金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測試劑盒)Oligophrenin-1 Antibody100 ul
艱難梭菌(TCD-A)核酸檢測試劑盒)Cytochrome c (D18C7) Rabbit mAb20 ul
艱難梭菌(TCD-B)核酸檢測試劑盒)Cytochrome c (D18C7) Rabbit mAb100 ul
肺炎鏈球菌(SP)/肺炎雙球菌核酸檢測試劑盒)OTX2 (D7Y3J) Rabbit mAb100 ul
單增李斯特菌(LM)核酸檢測試劑盒)CaMKII-α (D10C11) Rabbit mAb100 ul
蠟樣芽孢桿菌(BC)核酸檢測試劑盒)TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)20 ul
IL-7大鼠白介素7ELISA試劑盒實驗原理乙基丙二腦病蛋白抗體Britannilactone別名: 1,6α-Dihydroxyeriolanolide; Deacetylinulicin分子式: C15H22O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗炎;抗腫瘤;抑制增殖;旋覆花;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體7-Epi-5-eudesmene-1β,11-diol別名: 分子式: C15H26O2性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 桉葉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體Ustusol A別名: 分子式: C15H24O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗真菌;補身烷;對照品;標(biāo)準(zhǔn)品;微生物代謝產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
DNA切除修復(fù)蛋白1抗體Debilon別名: Debilone; 9α-Hydroxy-1(10)-aristolen-2-one分子式: C15H22O2性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 青木香;土青木香烷;馬兜鈴?fù)?;中藥對照品;中藥?biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
轉(zhuǎn)錄因子E2F6抗體Kanshone B別名: 分子式: C15H22O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 甘松;土青木香烷;馬兜鈴?fù)?;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
膠質(zhì)谷氨運載蛋白2抗體5-Deoxystrigol別名: 分子式: C19H22O5性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 獨腳金內(nèi)酯類;中藥對照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
膠質(zhì)谷氨運載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮谷氨運載蛋白)Desoxo-narchinol A別名: 分子式: C12H16O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 活性;抗神經(jīng)炎;甘松;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體1(10)-Aristolen-2-one別名: Aristol-1(10)-en-2-one分子式: C15H22O性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞: 抗菌;性;青木香;土青木香烷;馬兜鈴?fù)椋恢兴帉φ掌?;中藥?biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)