服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 分類 | 貨號 |
轉基因玉米品系LY038核酸檢測試劑盒 | 熒光探針法 | FS-P10737 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環(huán)數的增加,最終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據最終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
黑曲霉培養(yǎng)基: CM0085甘蔗糖蜜深層發(fā)酵檸檬。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28-30℃ 定期移植法;其他
尖孢鐮刀菌胡麻專化型進行分析檢測及抗病性鑒定,指導。模式菌株: no胡麻莖提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 66生長條件: 25
解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種用于環(huán)境污水處理的研究模式菌株: no活性污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃
四川游動放線菌模式菌株;抗金黃色葡萄球菌模式菌株: yes土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C
青霉大洋絲狀真菌模式菌株: no硫化物/TVG表層硫化物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃
大腸埃希氏菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: 33提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no 真空冷凍干燥法;定期移植法
-1527℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
肺炎克雷伯菌培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級: 2生長條件: 36℃ -80℃冰箱凍結法
大腸埃希菌科研及血清定型模式菌株: no病料提供形式: 凍干物安全等級: 2培養(yǎng)基: 335生長條件: 37
鏈霉菌生物活性微生物:抗菌活性譜:金黃色葡萄球菌 -- 枯草芽孢桿菌 8 大腸埃希氏菌 -- 熒光假單胞菌 -- 白假絲酵母 25 宛氏擬青霉 22模式菌株: no沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 1002生長條件: 28℃
青霉屬活性物質;抗炎模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C
卵孢霉屬培養(yǎng)基: CM0014抑菌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C 真空冷凍干燥
堅強芽孢桿菌培養(yǎng)基: 2模式菌株: no土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;其他
-1528℃冰箱凍結;真空冷凍干燥
根癌土壤桿菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0065提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法
正紅菇生長條件: 25-30培養(yǎng)基: 150組織塊提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no 定期移植法
異補骨脂素Ezrin/Radixin 埃茲蛋白(多肽)UBE2E2 泛素蛋白連接酶2E2抗體
肉桂F1 operon positive regulatory protein(NT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)UBE2D4 泛素蛋白連接酶D4抗體
肉桂F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)UBE2D3 泛素蛋白連接酶D3抗體
肉桂FABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪結合蛋白抗原UBE2D2 泛素蛋白連接酶D2抗體
果糖FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結構域相關蛋白抗原UBE2D1 泛素蛋白連接酶D1抗體
芒果苷FAK(Focaladhesin kinase) 粘著斑激酶抗原UBE2C 泛素蛋白連接酶C抗體
新芒果苷phospho-FAK(pTyr577) 磷化粘著斑激酶抗原Ube2B 泛素激活酶2B抗體
DL-薄荷phospho-FAK(pSer732)(phospho-Focal adhesion kinase) 磷化粘著斑激酶抗原UBE2A/UBE2B/RAD6 泛素結合酶E2蛋白A抗體
酪FAST kinase(Fas-activated serine/threonine kinase) Fas活化的絲/蘇氨激酶抗原Ube1L/UBE2 泛素激活酶2(泛素激活酶E1相關蛋白抗體)
R型人參皂苷Rh1FBN1 (fibrillin 1) 原纖維蛋白1抗原UBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活酶E1抗體
轉基因玉米品系LY038核酸檢測試劑盒phenylbutazone 保泰松(標準品) 質量規(guī)格:>98%
phenylbutazoneCalcium 保泰松鈣 質量規(guī)格:>98%
phenylbutazoneSodium 保泰松鈉 質量規(guī)格:>98%
Pirfenidone 吡非尼,哌非尼 質量規(guī)格:>98%
Pirfenidone 吡非尼,哌非尼(標準品) 質量規(guī)格:>98%
PitavastatinCalcium/NK-104 匹伐他汀鈣 質量規(guī)格:>98%
PitavastatinCalcium/NK-104 匹伐他汀鈣(標準品) 質量規(guī)格:>98%
Potassiumiodide 化鉀 質量規(guī)格:>98%
Praziquantel 吡喹 質量規(guī)格:>98%
Praziquantel 吡喹(標準品) 質量規(guī)格:>98%
PrazosinHCl 鹽哌唑嗪 質量規(guī)格:>98%
Prednisoloneacetate 醋潑尼松龍 質量規(guī)格:>98%
PrednisoneAcetate 醋潑尼松 質量規(guī)格:>98%
PrednisoneAcetate 醋潑尼松(標準品) 質量規(guī)格:>98%
Pregabalin 普瑞巴林 質量規(guī)格:>98%
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。