ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | LIF大鼠白血病抑制因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat leukemia inhibitory factor, LIF Elisa Kit |
貨號 | FS-R64630 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
雞白痢、雞傷寒抗體英文全稱anti-Mannose receptor antibody英文簡稱anti-MR Ab檢測范圍4084nmol/L-800ng/mL
富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體英文全稱anti-CD86 Antibody英文簡稱anti-CD86 Ab檢測范圍4085nmol/L-1200ng/mL
FAM135B蛋白抗體英文全稱ASP英文簡稱ASP檢測范圍4086nmol/L-10ng/mL
口蹄疫病A型抗體(N端)英文全稱vasopressin V2 receptor英文簡稱AVPR2檢測范圍4087nmol/L-20ng/ml
骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體英文全稱GLYCEROL英文簡稱Glycerol檢測范圍4088nmol/L-20ug/ml
腎刷狀緣抗體英文全稱permeability glycoprotein英文簡稱P-pg檢測范圍4089nmol/L-80ng/ml
神經(jīng)元核抗原抗體英文全稱mitochondrial respiratory chain 英文簡稱MRC檢測范圍4090nmol/L-20ng/ml
促卵泡激素抗體英文全稱Clostridium difficiletoxin toxin A英文簡稱CDT-A檢測范圍4091nmol/L-640ng/L
濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白抗體英文全稱Clostridium difficile toxin B英文簡稱CDT-B檢測范圍4092nmol/L-24pg/mL
纖維母細(xì)胞生長因子13抗體英文全稱thyroid-stimulating hormone receptor antibody英文簡稱TRAb檢測范圍4093nmol/L-48U/L
凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)英文全稱PAP-IgE英文簡稱PAP-IgE檢測范圍4094nmol/L-200ng/mL
絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體英文全稱Fatty acid synthetase inhibitors英文簡稱FASI檢測范圍4095nmol/L-120ng/mL
肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）英文全稱Lithocholic acid英文簡稱LCA檢測范圍4096nmol/L-720ng/L
肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）英文全稱Serum amyloid A2英文簡稱SAA2檢測范圍4097nmol/L-8μg/mL
缺氧誘導(dǎo)因子1α抑制蛋白抗體英文全稱monoamine neurotransmitter英文簡稱Mnt檢測范圍4098nmol/L-20ng/mL
磷酸化脆性組氨酸三聯(lián)體抗體英文全稱5′2 -Hydroxytryptamine英文簡稱5′2 -TH檢測范圍4099nmol/L-120ng/ml
人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒Src (L4A1) Mouse mAb100 ul
人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒Phospho-Mnk1 (Thr197/202) Antibody1 g
人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試劑盒Cycloheximide100 ul
人超敏生長激素(U S-GH)ELISA試劑盒Rictor (53A2) Rabbit mAb20 ul
人超敏游離雌三(uE3)ELISA試劑盒Rictor (53A2) Rabbit mAb100 ul
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒SRC-3 (11B1) Mouse mAb200 ul
人泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)100 ul
人泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒RhoA (67B9) Rabbit mAb20 ul
LIF大鼠白血病抑制因子ELISA試劑盒實驗原理A型流感病H9N1血凝素型抗體Ranolazine dihydrochloride別名: 分子式: C24H35Cl2N3O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
人類狀瘤病33抗體3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene別名: 分子式: C6H4Cl2OS性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
A型病H1N1蛋白抗體4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide別名: 分子式: C10H16N2O6S3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
甲型肝炎病聚蛋白VP1抗體Brinzolamide別名: 分子式: C12H21N3O5S3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
造血干特異性蛋白抗體2-Benzylacrylic acid別名: 分子式: C10H10O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
轉(zhuǎn)化生長因子β1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Racecadotril別名: 分子式: C21H23NO4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
同源盒蛋白C6抗體Benzyl 2-aminoaceta p-toluenesulfona別名: 分子式: C16H19NO5S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
同源盒蛋白C4抗體5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one別名: 分子式: C8H8OS2性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
