ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | BK大鼠血管舒緩激肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Rat bradykinin, BK Elisa Kit |
貨號 | FS-R64659 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
鋅指蛋白461抗體英文全稱mast cell proteinases英文簡稱MMCP-1檢測范圍4548nmol/L-20ng/mL
生長分化因子7抗體英文全稱Eosinophil Peroxidase英文簡稱EPO檢測范圍4549nmol/L-16ng/mL
GDNF家族受體α3抗體 GFR α3英文全稱amyloid beta peptide 1-40 antibody英文簡稱Aβ1-40Ab檢測范圍4550nmol/L-240ng/mL
神經(jīng)甘丙肽樣肽GALP抗體英文全稱kynurenic acid英文簡稱Kyn檢測范圍4551nmol/L-800ng/L
甘丙肽受體2抗體英文全稱8-hydroxy一2 deoxyguanosine英文簡稱8-HodG檢測范圍4552nmol/L-16ng/mL
甘丙肽受體3抗體英文全稱Cytochrome P450 1a2英文簡稱cyp1a2檢測范圍4553nmol/L-200U/L
腦腸肽受體抗體英文全稱Cytochrome P450 2e1英文簡稱cyp2e1檢測范圍4554nmol/L-120U/L
甘氨酸受體β/GlyR β抗體英文全稱Cytochrome P450 2d11英文簡稱cyp2d11檢測范圍4555nmol/L-80U/L
細(xì)胞核因子GCNF/維甲酸受體相關(guān)受體抗體英文全稱Cytochrome P450 2d12英文簡稱cyp2d12檢測范圍4556nmol/L-100U/L
G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體英文全稱Cytochrome P450 2c19英文簡稱cyp2c19檢測范圍4557nmol/L-64U/L
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體英文全稱HDM-IgG英文簡稱HDM-IgG檢測范圍4558nmol/L-200ng/mL
轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體英文全稱DERP1-IgG英文簡稱DERP1-IgG檢測范圍4559nmol/L-200ng/mL
轉(zhuǎn)錄因子Gli3抗體英文全稱C-C motif chemokine 6 英文簡稱CCL6檢測范圍4560nmol/L-3000pg/mL
GLIS2蛋白抗體英文全稱SERCA ATPase英文簡稱SERCA ATPase檢測范圍4561nmol/L-100mU/mL
味覺受體蛋白家族10亞5抗體英文全稱DERP1-IgE英文簡稱DERP1-IgE檢測范圍4562nmol/L-160ng/mL
血型糖蛋白δ抗體英文全稱Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 1英文簡稱UBA1檢測范圍4563nmol/L-80U/L
人重組激活因1(RAG-1)ELISA試劑盒Raf Family Antibody Sampler Kit100 ul
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 Phospho-eEF2 (Thr56) Antibody100 ul
人受體酪氨酸激酶(RTKs)ELISA試劑盒 FGF Receptor 2 (D4L2V) Rabbit mAb100 ul
人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2(RIPK2)ELISA試劑盒eEF2 Antibody100 ul
人晚期糖化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒Progesterone Receptor A/B (D8Q2J) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)300 ul
人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb100 ul
BK大鼠血管舒緩激肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol別名: 分子式: C19H16FNO性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
腺病六鄰體蛋白抗體3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline別名: 分子式: C19H15BrFN性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal別名: 分子式: C21H16FNO性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
轉(zhuǎn)錄因子HNF-3α抗體Dehydropitavastatin ethyl esr別名: 分子式: C27H26FNO4性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
熱休克蛋白β7抗體Pitavastatin ethyl esr別名: 分子式: C27H28FNO4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
E3連接酶抑制素受體2抗體Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropiona別名: 分子式: C7H10O3性狀: Liquid純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
透明質(zhì)及粘蛋白3抗體2-Cyclopropyl-3-[(diphenylphosphinyl)methyl]-4-(4-fluorophenyl)quinoline別名: 分子式: C31H25FNOP性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
22號染色體開放閱讀框28抗體6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil別名: 分子式: C5H6N4O3性狀: Red powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
