產品名稱 | KYSE-70人食管鱗狀細胞癌細胞 | 貨號 | AXB6396 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | KYSE-70 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
Ai-Solute carrier family 1/FITC 熒光素標記溶質攜帶物家族-1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
CT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
p19ARF抑癌基因抗體 Ai-P19ARF 0.1ml
SERPINA10 英文名稱： 絲酸蛋白酶抑制劑A10抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser1190) 英文名稱： 0酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh phospho-NIFK/MKI67IP(Thr234) 0酸化KI67相互作用蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
Ai-Somatostatin/GRIH /FITC 熒光素標記抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
CT-R (Calcitonin receptor) 降鈣素受體(抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
p21抗體 Ai-P21/WAF1/CIP1 0.1ml
SNX25 英文名稱： 分揀微管連接蛋白抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser1166) 英文名稱： 0酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-NFκB-p105/p50(Ser927) 0酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
CT-R (Calcitonin receptor) 降鈣素受體(抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
Ai-SMC1/FITC 熒光素標記染色體結構維持蛋白質1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
CD133 Ai-gen 造血干細胞抗原(多肽抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
少突細胞髓0脂糖蛋白抗體 Ai-Omgp 0.1ml
Duck salmonella 英文名稱： 鴨沙門氏菌抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser1142) 英文名稱： 0酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 0酸化谷受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml
CD133 Ai-gen 造血干細胞抗原(多肽抗原)Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
Ai-SOD1/FITC 熒光素標記超氧化物歧化酶1抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
ADRA2 peptide 能受體2抗原Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
抑癌基因p14抗體 Ai-P14ARF 0.2ml
KYSE-70人食管鱗狀細胞癌細胞SERPINB11 英文名稱： 絲酸蛋白酶抑制劑B11抗體 0.2ml
phospho-EGFR (Ser1070) 英文名稱： 0酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh Phospho-NMDAR1(Ser890) 0酸化谷受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
ADRA2 peptide 能受體2抗原Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
Ai-Tenascin/TN /FITC 熒光素標記細胞粘合素抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格： 0.2ml
Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
可溶性載質轉運蛋白22A17抗體 Ai-Slc22A17 0.2ml
Nuclear protein stromal aigen 1 英文名稱： 粘結蛋白SA1抗體 0.2ml
Phospho-EGFR (Ser1045) 英文名稱： 0酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Rhesus aibody Rh phospho-MCAM(Tyr641) 0酸化黑色素瘤細胞粘附分子CD146抗體 規(guī)格 0.1ml
Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原Multi-class aibodies規(guī)格： 0.5mg
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
