操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品貨號 |
Caspase 6 Activity Assay Kit | 20次|100次 | FS-X9543 |
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒是采用分光光度法檢測細胞或組織裂解液中caspase 6酶活性或純化的caspase 6酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標準曲線外可以檢測20個樣品。 Caspase是一個在細胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 6也稱Mch-2,有時被寫作caspase-6或caspase 6,初從人的Jurkat細胞中被發(fā)現(xiàn)。Caspase 6的前體被granzyme B剪切后可以形成活化的caspase 6二聚體,而活化的caspase 6被發(fā)現(xiàn)可以誘導細胞凋亡。Caspase 6可以剪切PARP和keratin-18,也可以剪切細胞核核被膜上的關(guān)鍵組成蛋白Lamin A。Caspase家族中僅caspase 6可以剪切Lamin A。Caspase 6對于Lamin A的識別位點是VEID。本試劑盒利用了caspase 6對于VEID識別的特異性,設計了相應的caspase 6特異的顯色底物Ac-VEID-pNA。 本Caspase 6活性檢測試劑盒是基于caspase 6可以催化底物Ac-VEID-pNA(acetyl-Val-Glu-Ilel-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 6的活性。pNA在405nm附近有強吸收。 試劑盒中提供了caspase 6催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 6酶活性的標準品。 試劑盒組分: 裂解液——————8ml 檢測緩沖液——————8ml Ac-VEID-pNA(2mM)———200μl pNA(10mM)——————200μl 儲存條件:-20℃。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
唾液suan轉(zhuǎn)移mei1(SIAT1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SIAT1 ELISA Kit,SIAT1,
頭蛋白(NOG)elisa檢測試劑盒 英文名稱:NOG ELISA Kit,NOG,
糖原蛋白2(GYG2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:GYG2 ELISA Kit,GYG2,
meiⅠ(CA1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CA1 ELISA Kit,CA1,
髓鞘型脂肪suan結(jié)合蛋白(FABP8)elisa檢測試劑盒 英文名稱:FABP8 ELISA Kit,F(xiàn)ABP8,
絲裂原激活蛋白激mei激mei激mei1(MAP3K1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MAP3K1 ELISA Kit,MAP3K1,
絲氨suan/蘇氨suan激mei39(STK39)elisa檢測試劑盒 英文名稱:STK39 ELISA Kit,STK39,
輸出蛋白7(XPO7)elisa檢測試劑盒 英文名稱:XPO7 ELISA Kit,XPO7,
矢車菊β1(CENTβ1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CENTβ1 ELISA Kit,CENTβ1,
載脂蛋白B(APOB)elisa檢測試劑盒 英文名稱:APOB ELISA Kit,APOB,
抑制蛋白β2(ARRβ2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ARRβ2 ELISA Kit,ARRβ2,
原鈣黏suα13(PCDHα13)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PCDHα13 ELISA Kit,PCDHα13,
胰島su樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)elisa檢測試劑盒 英文名稱:IGFBP4 ELISA Kit,IGFBP4,
延長蛋白3(ELP3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ELP3 ELISA Kit,ELP3,
血小板親和蛋白2(PKP2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PKP2 ELISA Kit,PKP2,
血管生成su樣蛋白2(ANGPTL2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ANGPTL2 ELISA Kit,ANGPTL2,
胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TARC ELISA Kit,TARC,
Caspase 6 活性檢測試劑盒標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Valsartan
二十烷五烯suan乙酯標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:
萬乃韋相關(guān)物質(zhì)F標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
靛藍胭脂紅標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Indigotindisulfonate Sodium
相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
丙沙星標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Ciprofloxacin
地平相關(guān)物質(zhì)A標準品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
mi氮平標準品 規(guī)格:350mg 英文名稱:Mirtazapine
替莫zuoan標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Temozolomide
三水楊suan標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Trisalicylic Acid