ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | T大鼠睪酮ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Testoterone, T Elisa Kit |
貨號 | FS-R64671 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
谷氨酸受體相關蛋白1抗體英文全稱tyrosine kinase A英文簡稱TrkA檢測范圍4740nmol/L-1000pg/mL
G蛋白α抑制蛋白1抗體英文全稱Substance P Receptor英文簡稱SP-R檢測范圍4741nmol/L-500pg/mL
谷胱甘肽合成酶抗體英文全稱SSA IgG antibody英文簡稱SSA IgG檢測范圍4742nmol/L-200ng/mL
生長停滯特異性蛋白6抗體英文全稱SSB IgG antibody英文簡稱SSB IgG檢測范圍4743nmol/L-180ng/mL
谷氧還蛋白/巰轉移酶抗體英文全稱glutaminyl cyclase英文簡稱QC檢測范圍4744nmol/L-200U/L
谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺轉移酶英文全稱Peptidyl Prolyl Cis;Trans Isomerase NIMA Interacting Protein 1英文簡稱PIN1檢測范圍4745nmol/L-10ng/mL
α-半乳糖苷酶抗體英文全稱Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A英文簡稱TNFRSF11A;RANK檢測范圍4746nmol/L-10ng/mL
顆粒酶K抗體英文全稱Phospholamban英文簡稱PLN檢測范圍4747nmol/L-10ng/mL
γ谷氨酰轉移酶抗體英文全稱HS1-associated protein X-1英文簡稱HAX-1檢測范圍4748nmol/L-20ng/mL
甘油磷酸二酯酶磷酸結構域5抗體英文全稱SERCA2α英文簡稱SERCA2α檢測范圍4749nmol/L-1000pg/mL
蛋白偶聯受體55抗體英文全稱Dopamine receptor D3英文簡稱DRD3檢測范圍4750nmol/L-40ng/mL
生長抑制DNA損傷因45γ抗體 GADD45γ英文全稱soluble terminal complement complex SC5b9英文簡稱SC5b9檢測范圍4751nmol/L-800ng/ml
生長停滯特異性蛋白2家族3抗體英文全稱Anti-titin Antibody英文簡稱TTN檢測范圍4752nmol/L-160ng/mL
生長停滯特異性蛋白2家族1抗體英文全稱spermine英文簡稱Spm檢測范圍4753nmol/L-2000pmol/mL
糖皮質激素誘導亮氨酸拉鏈蛋白抗體英文全稱Rabies virus specific IgA antibody英文簡稱RVA-sIgA檢測范圍4754nmol/L-
G蛋白偶聯受體65抗體英文全稱fibrin英文簡稱fibrin檢測范圍4755nmol/L-1000pg/mL
人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒Ribosomal Protein L7a (E109) Antibody100 ul
人血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒Phospho-β-Arrestin 1 (Ser412) (6-24) Mouse mAb100 ul
人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor α (Tyr762) (D9B1N) Rabbit mAb100 ul
人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒 Lamin B2 (E1S1Q) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul
人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒Notch2 (8A1) Rabbit mAb100 ul
人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒Notch4 (L5C5) Mouse mAb100 ul
人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒 eIF4A (F52) Antibody100 ug
人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA試劑盒 CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate)100 ul
T大鼠睪酮ELISA試劑盒實驗原理兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Frigoribacterium sp/
鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Escherichia coli
大鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus subtilis
人血管生長素(ANG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Paraphoma chrysanthemicola
鼠血管生長素(ANG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces lilacinus
大鼠血管生長素(ANG)ELISA Kit,48T/96T 用途: 能于30℃、48時降解約30%濃度為200ppm的苯甲,苯甲為碳源(無機鹽培養(yǎng))
人血管生成素1(ANG-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Escherichia coli
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準