商品介紹：
產(chǎn)品名稱 | 人瓣膜間質(zhì)細胞永生化;PVIC-HTERT | 貨號 | AXB10646 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | PVIC-HTERT |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒 ，英文名： IHH ELISA Kit
Mouse immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
MouseOsteoprotegerin,OPGELISAKIT 小鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanElastaseELISAKit人彈性蛋白酶規(guī)格：48T/96T
細胞3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量檢測試劑盒?咀?
小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒 ，英文名： NF-L ELISA Kit
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA檢測試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T
人甘油二酯(DAG)免疫試劑盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit
RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
B?咀?
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit
Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒
rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit?咀?
人瓣膜間質(zhì)細胞永生化;PVIC-HTERT小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒
Human nephrin (nephrin) ELISA Kit 人蛋白(nephrin)ELISA試劑盒
humahyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgGELISA試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96?咀?
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
